高效液相色譜,妳可以簡單的想象固定相是壹個多孔的海綿狀的圓柱形結構,樣品從孔中進出。因為每種物質的吸附能力不同,所以在色譜圖中會畫出距離。
與實驗相關的參數:
1,保留時間——即定性數據參數。
如果使用相同的色譜柱和相同的流動相來分析相同的樣品,那麽該樣品的保留時間應該是固定的。保留時間不同的色譜峰應顯示不同的物質。如果運行反相色譜,色譜峰越靠後,對應的極性越小。
2.峰面積-即壹個定量數據參數。
這是您可以在色譜圖中讀取的參數。在相同的色譜條件下,同壹物質的濃度與峰面積成正比。也就是說,如果妳制備1.0mg/ml的X物質,註射後的峰面積是10000,那麽如果妳制備0.5mg/ml的X物質,註射後的峰面積差不多是5000。
3.波長——這是實驗順利進行的先決條件。
同樣的樣品,同樣的方法,同樣的色譜柱,在不同的波長下,峰面積不同。壹種物質意味著它吸收某些特殊的波長。例如,壹種物質在210nm和254nm處有吸收。該物質在280納米的波長下可能檢測不到。所以壹個實驗方法從波長掃描開始。