二樓展區旨在向青年學生和廣大公眾普及《like eyes》中的護眼知識，幫助公眾有效保護眼睛，以應對社會生活方式的改變對視力日益增加的損害。
眼鏡博物館的“鎮館之寶”都在三樓的展區。如果說二樓展區是為了普及像眼睛壹樣的知識，那麽三樓展區主要是讓大眾全面了解眼鏡這壹矯正人類視力的主要工具，揭示其背後的科技知識和文化內涵，同時展示中國乃至世界眼鏡行業發展的歷史、現狀和前景。
整個展廳采用了大量的高科技展覽和互動參與式展覽，讓觀眾通過動手掌握各種知識。個性化眼鏡設計室采用空中透明屏幕投影技術，讓觀眾根據自己的喜好為自己設計個性化眼鏡。
上海眼鏡博物館展廳還展出了壹些珍貴的眼鏡收藏品，包括玳瑁鉸接直腿眼鏡、古代西式眼鏡和明代萬歷年間的老式吳八角眼鏡。此外還有《中國眼鏡與收藏》作者趙孟江先生收藏的古眼鏡展。