《蒙娜麗莎》是意大利最早的半身像。畫中人物雙手合十坐在椅子扶手上，從頭部到腰部呈半身，改變了早期肖像只畫頭部和上半身、切掉胸部的構圖，為未來的畫家和攝影師樹立了新的肖像基本結構。
列奧納多·達·芬奇利用金字塔結構簡單而完整地將這位女士置於畫中。她雙手合十，形成金字塔前的壹角。她的胸部、脖子和臉像她的手壹樣閃著柔和的光。這些有機部分的光線變化，表現出身體的豐滿和柔軟，包括上面的微笑。西格蒙德·弗洛伊德將這種微笑理解為畫家對母親的感傷懷舊。還有人形容它幼稚、誘人甚至欣喜若狂或悲傷。需要指出的是，達·芬奇當時的大部分肖像畫都有這樣的笑容。
神秘的蒙娜麗莎不僅以微笑聞名，而且畫中人物的眼睛也相當獨特。無論妳從哪個角度看這幅畫，都會發現蒙娜麗莎的眼睛正直視著妳，讓人覺得蒙娜麗莎的眼睛是有生命的，會隨著觀眾的視角而遊動，對所有觀眾抱以永恒的微笑。
這幅肖像畫雖然技法簡單，但人與背景的和諧使這幅畫成為歷史上最著名、最細致的壹幅。畫中女子頭發和衣服的曲線與背景中山谷和河流的曲線相匹配。整幅畫的和諧體現了達芬奇關於人與自然聯系的理念，使這幅畫成為達芬奇世界觀和天才的永久記錄。
在人的背後，壹個遙遠的背景壹直延伸到遙遠的冰山。只有彎彎曲曲的路和遠處的橋，才顯示出人的存在。模糊的分割線，瀟灑的人物，明暗對比明顯，有壹種平常心，都是列奧納多的風格。
蒙娜麗莎是壹個人在想象的背景前的第壹幅肖像。有趣的是，後面的風景並不對稱。左邊的景色明顯比右邊的低。壹些評論家認為這表明左邊的部分是後來添加的。