那麽如何利用大腸桿菌生產胰島素呢?從基因工程的角度來說吧。
1.提取目標基因:
胰島素基因可以從人的DNA中提取出來,目的基因可以通過限制性核酸內切酶從原始DNA中分離出來。
2.提取質粒:
利用細胞工程,培養大腸桿菌,從大腸桿菌的細胞質中提取質粒。
3.基因重組:
取出目的基因和質粒,用同樣的限制性內切酶切割質粒,然後用DNA連接酶將目的基因和質粒“縫合”,形成可以表達胰島素的DNA質粒。
4.將質粒送回大腸桿菌:
在大腸桿菌的培養基中加入含鈣的物質,如CaCl2 _ 2,會使細胞吸收外源基因。此時,當重組質粒也被放入培養基中時,它將被大腸桿菌吸收。
5.胰島素生產:
在大腸桿菌中,經過表達、轉錄和翻譯後,質粒將產生胰島素蛋白。通過大腸桿菌的增殖,可以大量生產胰島素!