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用大腸桿菌生產人胰島素的詳細步驟

大腸桿菌大量生產胰島素的原理應用於現代生物技術的轉基因技術。首先將人的胰島素基因從人類染色體中分離出來,插入到從細菌細胞中提取的質粒(壹種小環狀DNA)中,然後將這種融合了胰島素基因的質粒轉移到大腸桿菌的細胞中,然後胰島素基因會引導大腸桿菌的細胞產生胰島素,胰島素可以被人類提取和收集,用於治療糖尿病患者。

那麽如何利用大腸桿菌生產胰島素呢?從基因工程的角度來說吧。

1.提取目標基因:

胰島素基因可以從人的DNA中提取出來,目的基因可以通過限制性核酸內切酶從原始DNA中分離出來。

2.提取質粒:

利用細胞工程,培養大腸桿菌,從大腸桿菌的細胞質中提取質粒。

3.基因重組:

取出目的基因和質粒,用同樣的限制性內切酶切割質粒,然後用DNA連接酶將目的基因和質粒“縫合”,形成可以表達胰島素的DNA質粒。

4.將質粒送回大腸桿菌:

在大腸桿菌的培養基中加入含鈣的物質,如CaCl2 _ 2,會使細胞吸收外源基因。此時,當重組質粒也被放入培養基中時,它將被大腸桿菌吸收。

5.胰島素生產:

在大腸桿菌中,經過表達、轉錄和翻譯後,質粒將產生胰島素蛋白。通過大腸桿菌的增殖,可以大量生產胰島素!

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