細胞凍存復蘇的原理是什麽？討論其原理和機制。

答:細胞凍存復蘇的原理是慢凍快融。細胞冷凍保存是壹種在超低溫下長期保存細胞的方法。在-196℃的超低溫下，細胞處於休眠狀態，因此可以長期保存。細胞在冷凍狀態下，往往會因電解質濃度的升高和溶液中冰晶的形成而受到損傷。因此，冷凍細胞必須懸浮在無毒、低分子量、高溶解度、能快速滲透到活細胞中的特定保護劑中，如甘油、二甲基亞碸、聚乙烯吡咯烷酮、乙二醇、葡萄糖等，其中前兩種是最常用的。冷凍過程中的冷卻速度對冰晶的形成有很大的影響。如果凍結速度過快，細胞內的水在細胞外凍結時不會滲出細胞外，這樣細胞內部就會形成冰晶，損傷細胞。如果降溫太慢，細胞外溶液會凍結太久，導致細胞內大量水分滲出，細胞收縮死亡。合適的降溫速率是溫度從每分鐘1℃降至-70℃後，立即放入液氮罐中快速降溫至-196℃，能經受長期儲存。

細胞復蘇是將細胞懸液從冷凍狀態以壹定的復溫速度恢復到常溫。在-70℃以下的溫度下，細胞內的生化反應極其緩慢，甚至停止。當它恢復到常溫時，細胞的形態結構保持正常，生化反應可以恢復。在細胞復蘇過程中，如果復溫速率不當，還可能造成細胞內凍結，造成細胞丟失。復蘇過程中，溫度壹般以較快的速度升高，在65438±0 ~ 2min內恢復到常溫，使細胞快速通過最易受損的-5 ~ 0℃，細胞內外不會重新形成大冰晶，也不會長時間暴露在溶質濃度較高的溶液中，使冰晶和溶質對細胞的損傷降到最低，復蘇後保持正常的結構和功能。所以細胞凍存復蘇的原理是慢凍快融。

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