免疫動物是用靶抗原免疫小鼠產生致敏B淋巴細胞的過程。抗原通過血液循環或淋巴循環進入外周免疫器官，刺激相應的B淋巴細胞克隆、活化、增殖並分化為致敏B淋巴細胞。
2、細胞融合:
用二氧化碳氣體殺死小鼠，無菌操作取出脾臟，在培養皿中擠壓研磨，制備脾細胞懸液。將制備的同源骨髓瘤細胞與小鼠脾細胞按壹定比例混合，加入融合促進劑聚乙二醇。在聚乙二醇的作用下，各種淋巴細胞可與骨髓瘤細胞融合，形成雜交瘤細胞。
3.選擇性文化:
選擇性培養的目的是篩選融合的雜交瘤細胞，壹般使用HAT選擇性培養基。
4.雜交瘤陽性克隆的篩選和克隆:
只有少數在HAT培養基中生長的雜交瘤細胞分泌具有預定特異性的單克隆抗體，因此必須對其進行篩選和克隆。有限稀釋法通常用於克隆雜交瘤細胞。
5.單克隆抗體的大量制備:
大量的單克隆抗體主要是通過動物體內誘導和體外培養制備的。
擴展數據:
單克隆抗體的優勢:
1.雜交瘤可以在體外“永久”存活並傳代。只要細胞系不發生基因突變，就能持續產生高特異性和均壹性的抗體。
2.可以從相對不純的抗原中獲得大量高度特異性和均壹性的抗體。
3.因為可以獲得“無限”的均質抗體，所以適用於以標記抗體為特征的免疫學分析方法。
4.由於其高特異性和單壹的生物學功能，單克隆抗體可用於體內放射免疫顯像和免疫導向治療。
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