青黴素的發現者是英國細菌學家弗萊明。1928年的壹天，弗萊明在他的壹間簡陋的實驗室裏研究導致人體發熱的葡萄球菌。由於蓋子沒有蓋好，他發覺培養細菌用的瓊脂上附了壹層青黴菌。這是從樓上的壹位研究青黴菌的學者的窗口飄落進來的。使弗萊明感到驚訝的是，在青黴菌的近旁，葡萄球菌忽然不見了。這個偶然的發現深深吸引了他，他設法培養這種黴菌進行多次試驗，證明青黴素可以在幾小時內將葡萄球菌全部殺死。弗萊明據此發明了葡萄球菌的克星—青黴素。
1929年，弗萊明發表了學術論文，報告了他的發現，但當時未引起重視，而且青黴素的提純問題也還沒有解決。
1935年，英國牛津大學生物化學家錢恩和物理學家弗羅裏對弗萊明的發現大感興趣。錢恩負責青黴菌的培養和青黴素的分離、提純和強化，使其抗菌力提高了幾千倍同，弗羅裏負責對動物觀察試驗。至此，青黴素的功效得到了證明。
由於青黴素的發現和大量生產，拯救了千百萬肺炎、腦膜炎、膿腫、敗血癥患者的生命，及時搶救了許多的傷病員。青黴素的出現，當時曾轟動世界。為了表彰這壹造福人類的貢獻，弗萊明、錢恩、弗羅裏於1945年***同獲得諾貝爾醫學和生理學獎。