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多重免疫組化(mIHC)和免疫熒光的區別

免疫熒光技術(Immunofluorescence technique,IF )又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展最早的壹種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的壹項技術。很早以來就有壹些學者試圖將抗體分子與壹些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。

多重免疫組化(mIHC):主要的技術原理來自TSA技術,TSA即酪酰胺信號放大(Tyramide signal amplification)是壹類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。該技術可與高性能染料Alexa Fluor?、傳統熒光染料和比色檢測系統相兼容。 TSA主要原理是利用酪胺Tyramide的過氧化物酶反應(酪胺鹽在HRP催化H202下形成***價鍵結合位點),產生大量的酶促產物,該產物能與周圍的蛋白殘基(包括色氨酸、組氨酸和酪氨酸殘基)結合,這樣在抗原-抗體結合部位就有大量的生物素沈積,與隨後加入的Streptavidin—HRP/熒光基團結合,經幾次這樣的循環放大,可以結合大量的酶分子or熒光基團,結果使其檢測信號得到幾何級放大。

mIHC和IP的區別:

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