當前位置:吉日网官网 - 傳統美德 - 人源化抗體如何工業化生產?

人源化抗體如何工業化生產?

在WB核心理論:抗原與抗體的特異性反應中,作者提到WB的核心原理是抗原與抗體的特異性反應,這就涉及到WB中最關鍵的因素:抗體,尤其是初級抗體。合適的壹抗和二抗決定了WB實驗的成功和實驗結果的質量(WB帶和背景)。我們知道抗體可以分為單克隆抗體(MAb)和多克隆抗體(pAb)。單克隆抗體只能結合特定的單壹抗原,而多克隆抗體可以結合壹種以上的抗原。因此,單克隆抗體的特異性明顯強於多克隆抗體。在WB實驗中,用單克隆抗體檢測目的蛋白,大多呈現單壹清晰的條帶,實驗效果良好。但使用多克隆抗體可能會出現多條帶或條帶不清,實驗結果質量不好。

這裏筆者簡單講壹下抗體生產和制備的歷史和技術,它決定了抗體生產的質量和類型。抗體的生產和制備過程可分為三個階段:傳統方法免疫動物獲得抗體、雜交瘤技術制備抗體和基因工程技術制備抗體。

1.免疫動物制備抗體的傳統方法:將各種方法獲得的免疫原(抗原)註射到動物(如大鼠、小鼠、兔)體內,刺激動物體內的B細胞分化成熟,產生並分泌抗體,然後收集動物血清,分離純化得到成品抗體。由於早期免疫原的制備、純化技術和成本限制,早期傳統方法制備的抗體大多為多克隆抗體。這種方式成本相對較低,但需要使用大量動物,容易導致“虐待動物”。2016年,抗體巨頭聖克魯斯因虐待動物被罰款,並禁止銷售多克隆抗體。

2.雜交瘤技術制備抗體:1975年,英國科學家米爾斯坦和法國科學家科勒將小鼠來源的B淋巴細胞與腫瘤細胞融合,形成雜交瘤細胞,不僅具有B細胞的抗體產生和分泌功能,還具有腫瘤細胞的無限增殖功能。技術上,首先通過皮下註射、腹腔註射、血管內註射等方式將免疫原註入動物體內,刺激動物產生特異性B細胞;然後處死動物,收集脾臟B細胞。將b細胞與腫瘤細胞體外融合制備雜交瘤細胞,篩選雜交瘤細胞並進行體外培養。抗體可以通過在體外擴增雜交瘤細胞並收集和純化培養基的上清液來獲得,或者通過將雜交瘤細胞註射到動物體內(血管、腹腔等)來獲得。)以及收集和純化動物體液(腹水、血清等)。).雜交瘤技術誕生了第壹代單克隆抗體,特異性強,易於大量生產。

3.基因工程技術制備抗體:基因功能技術使研究人員能夠在體外重組——將任意基因片段插入到特定的表達載體(質粒)中,然後將編輯好的質粒轉入特定的細胞株和細胞系中進行體外擴增和培養,以獲得該基因片段在體外的轉錄和翻譯,從而制備抗體。基因工程技術使抗體的產生更快,使人源化抗體更方便,進而成為臨床治療的抗體藥物。該技術生產的抗體是特異性高的均壹抗體,易於工業化大規模生產。近年來Abcam公司生產的重組單克隆抗體就是針對這類技術生產的抗體,特異性高,親和力強。

  • 上一篇:五講四美三熱愛指的是什麽內容
  • 下一篇:什麽是八仙桌 八仙桌的尺寸
  • copyright 2024吉日网官网