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抗體的制備方法有哪些

免疫途徑有多種多樣,如靜脈內、腹腔內、肌肉內、皮內、皮下、淋巴結內註射等,壹般常用皮下或背部多點皮內註射,每點註射0.1ml左右。途徑的選擇決定於抗原的生物學特性和理化特性,如激素、酶、毒素等生物學活性抗原,壹般不宜采用靜脈註射。家兔是最常用以產生抗體的動物,因此這裏主要討論兔血的收集。羊等較大動物以頸靜脈、動脈取血,鼠等小動物取血可參閱有關資料。取兔血有兩種方法,壹是耳緣靜脈或耳動脈放血,壹是頸動脈入血,也可心臟采血。取動脈或靜脈放血時,將兔放入壹個特造的木匣或籠內,耳露於箱(籠)外,也可由另壹人捉住兔身。剪去耳緣的毛,用少許二甲苯塗抹耳廓,30s後,耳血管擴張、充血。用手輕拉耳尖,以單面剃須刀或尖的手術刀片,快速切開動脈或靜脈,血液即流出,每次可收集30~40ml。然後用棉球壓迫止血,凝血後洗去二甲苯。二星期後,可在另壹耳放血。此法可反復多次放血。頸動脈放血時,將兔仰臥,固定於兔臺,剪去頸部的毛,切開皮膚,暴露頸動脈,插管,放血。放血過程中要嚴格按無菌要求進行。

收集的血液置於室溫下1h左右,凝固後,置4℃下,過夜(切勿冰凍)析出血清,離心,4000rpm,10min。在無菌條件,吸出血清,分裝(0.05~0.2ml),貯於-40℃以下冰箱,或凍幹後貯存於4。C冰箱保存。

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