脂肪檢測方法可用索式提取法。
壹、索式提取法(經典方法)
1、原理:
樣品經前處理後,放入圓筒濾紙內,將濾紙筒置於索式提取管中,利用乙醚或石油醚在水浴中加熱回流,使樣品中的脂肪進入溶劑中,回收溶劑後所得到的殘留物,即為脂肪(粗脂肪)采用這種方法測出遊離態脂,此外還含有磷脂、色素、蠟狀物、揮發油、糖脂等物質,所以用索氏提取法測得的脂肪為粗脂肪。
2、 適用範圍與特點
索氏提取法適用於脂類含量較高,結合態的脂類含量較少,能烘幹磨細,不宜吸濕結塊的樣品的測定。此法只能測定遊離態脂肪,而結合態脂肪無法測出,要想測出結合態脂肪需在壹定條件下水解後變成為遊離態的脂肪方能測出。
二、實驗操作流程
1、濾紙筒的制備
將濾紙剪成長方形8×375px ,卷成圓筒,直徑為150px,將圓筒底部封好,最好放壹些脫脂棉,避免向外漏樣。
2、稱取樣品,將樣品烘幹磨細,稱取壹定量與紙筒封好上口,最好用測定水的樣品。
3、索式抽提器的準備
索氏抽提器由三部分組成,回流冷凝管、提取管、提脂瓶組成。提脂瓶在使用前需烘幹並稱至恒重。其它要幹燥。
4、抽提
將裝好樣的紙筒放入抽提管 , 倒入乙醚,乙醚的量從提取管加入,加入的量為提取瓶體積的2/3 接上冷凝裝置,在恒溫水浴中抽提,水浴溫度大約為55℃左右,可用濾紙檢驗,理論值抽提6-8小時,實際值3-4小時,但也根據樣品性質來決定。
5、回收乙醚
當乙醚在提取管內即將虹吸時立即取下提取管,將其下口放到乙醚回收瓶內,使之傾斜,然後將提取瓶放到100-150℃烘箱烘至恒重。
6、計算
脂肪%= (W2-W1)/W x 100,W2——瓶和樣品重(g)W1——瓶子重量(g) W——樣品重量(g),或:脂肪%=(抽提後濾紙與樣品重量—抽提前濾紙重量)/樣品重量 × 100,濾紙筒應事先放入燒杯與100-105℃烘箱烘至恒重。