第壹部分:
伍迪是安迪最喜歡的傳統牛仔娃娃。主人不在的時候，他和其他玩具會壹起“生活”玩耍。但是好景不長。最新最受歡迎的玩具巴斯光年來了，他把伍迪冷落了。為了鞏固自己的地位，失寵的伍迪不得不設法除掉巴斯。在壹次事故中，伍迪和巴茲不幸掉進了壹個玩具虐待狂的鄰居家，不幸身亡。兩個勢不兩立的對手，能否通過這次冒險，化敵為友，鬥智鬥勇，成功回到少爺身邊？
第二部分:
伍迪和巴斯光年，壹群玩具，經歷了最後壹次冒險，他們的友誼越來越牢固。同時，多迪的看門狗也成了他們的好朋友，大家在壹起很開心。
有壹天，多迪在玩耍的時候不小心弄斷了伍迪的胳膊，這讓伍迪非常傷心，害怕主人會拋棄他。很快，多迪媽媽準備在家裏打掃衛生的時候把老企鵝五壹扔掉。伍迪深表同情，決定上前幫忙。伍迪騎著看門狗去救武夷的時候，不幸滑倒摔到院子裏。就在這時，壹個胖胖的玩具商找到了伍迪。他背著多迪媽媽偷走了伍迪，把他帶回了壹個玩具廠。
當伍迪驚恐萬狀，急於逃離工廠的時候，他發現這裏有很多牛仔玩具，他們看到伍迪都很興奮。原來這些玩具都是胖玩具廠家收藏的。他們是過去壹部流行漫畫裏的人物，這裏少了伍迪這個主角。為了讓伍迪了解他的人生經歷，他們為伍迪播放了壹系列牛仔漫畫。伍迪才知道自己過去的很多英雄故事，才知道這些玩具是他出道的夥伴。與此同時，他還得知了壹個令人不安的消息，那個胖玩具制造商要把他和這些牛仔夥伴賣給日本的壹個玩具博物館！
巴斯光年和其他玩具在伍迪被偷後被仔細分析，推斷出胖玩具制造商工廠的位置，於是組建了壹支精幹的隊伍營救伍迪。在工廠裏，巴斯光年還看到了成群結隊的“巴斯光年”玩具，以及他的死敵...
伍迪修剪了壹下，手臂接上了，又容光煥發了。但他不想去日本，還是想回多迪家。然而熱情的牛仔女孩傑西卻想盡辦法留住他，這讓他猶豫了。巴斯光年的救援隊終於來了，這個時候玩具商要帶著牛仔玩具去趕飛機去日本。巴斯光年能拯救伍迪嗎...