第壹作者簡介:劉羽琦(1975-)，女，碩士，講師。主要研究方向:分析化學和配位化學。e-Mai:l 1 iunqi 7547 @ 163 . com
分光光度法測定藥品和食品中的微量VC
劉羽琦1，楊銳1，楊勇2
(1.昆明理工大學理學院，雲南昆明650093；2.昆明醫學院藥理學教研室，雲南昆明650031)
文摘:利用抗壞血酸在室溫下能快速還原Fe3+的原理，提出了壹種簡單、快速的測定VC的方法。
Fe2+和Fe2+與2，2'-聯吡啶反應生成紅色配合物，配合物的最大吸收峰位於520 nm處。
VC的質量濃度在0.088 ~ 7.0 mg/L範圍內符合比爾定律，用此法測定食品和片劑中VC的含量。
相對標準偏差小於1.5%，回收率在96.3% ~ 105.0%之間。
關鍵詞:分光光度法；聯吡啶；維生素c；含量測定
中國圖書館分類號:O65文獻識別碼:A文號:1007-855 x(2008)02-0112-04。
食品和飲料中維生素C的測定
分光光度法測定藥物
劉玉-齊1，楊銳1，楊勇2
(1.昆明理工大學理學院，昆明650093；
2.昆明醫科大學藥學系，昆明650031
文摘:本文介紹了壹種簡單、快速的測定VC的方法。這種方法基於
在室溫下，抗壞血酸迅速將Fe(ⅲ)還原成Fe(ⅱ),而後者與抗壞血酸反應
聯吡啶(2，2'-hipy)形成紅色絡合物，其最大吸收波長為520
nm。VC濃度在每1000毫升溶液0.088-7.0毫克範圍內符合比爾定律。專業的
將該方法用於食品和藥品的測定，相對標準偏差(n=6)小於65438±05%
回收率在96 3% -105 0%之間。
關鍵詞:分光光度法；維生素C；聯吡啶；內容確定性
0的前言
VC有抗壞血病作用，所以又叫抗壞血酸。是人體不可缺少的重要營養素。
質量，經常在新鮮蔬菜和水果中發現。因為抗壞血酸參與體內的壹系列代謝和反應，可以促進膠原蛋白和粘多糖的生成。
合成，增加微血管的致密性，降低其通透性和脆性，增加機體的抵抗力。當缺乏時，會引起造血功能障礙、貧血、
微血管壁通透性增加，脆性增強，血管易破裂出血，嚴重者肌肉、臟器出血死亡。這些癥狀在臨床上很常見。
這叫做壞血病。因此，抗壞血酸不僅是外界提供的必需營養素，也是維持正常生命過程所必需的。
壹種需要的有機物。人類每日最低需要量為75毫克。長期缺乏抗壞血酸會導致壹些營養不良癥狀和相應的
疾病，因此，VC對維持人體健康非常重要。抗壞血酸是壹些食物中的營養成分，其含量的測定有以下幾個原因。
對指導人們合理飲食，正確補充營養有壹定的意義。
目前測定抗壞血酸的方法有2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼分光光度法[1]和熒光分光光度法。
法、近紅外分光光度法[2]、電位滴定法[3-4]、鉬藍比色法[5]、褪色分光光度法[6]、高效液相色譜法[7]等。
每種方法各有優點，但也有壹定的局限性，如2，6-二氯苯酚滴定法和2，4-二硝基苯肼分光光度法，操作復雜，有試紙。
2，4-二硝基苯肼分光光度法的樣品分析需要幾個小時，因此不能快速測定[8]。
二醇基團將Fe3+定量還原為F2+e並與2，2’-聯吡啶反應，用2，2’-聯吡啶進行顯色反應
Fe2+-VC顯色體系在本文研究的最佳測定條件下，用分光光度法間接測定VC的含量，因為殘留的Fe3+也
它可以用2，2’-聯吡啶著色，並且可以被NaF掩蔽。該方法簡便、快速，結果令人滿意，適用於食品和片劑中VC的含量測定。
決心提供了壹種方法。
1測試零件
1.1主要儀器和試劑
722光柵分光光度計(山東高密分析儀器廠)；電子分析天平(北京賽多利儀器系統有限公司)；
六孔數碼水浴鍋(金壇環保儀器廠)；搗碎機
0.000 1.250 mol/L維生素C標準溶液:準確稱取維生素C(分析純)0.01.01 g，加入適量pH為3的三氯。
溶解乙酸溶液，定量轉移至500mL棕色容量瓶中，用pH值為3的三氯乙酸溶液稀釋，置於暗處。
Fe3+標準溶液:0.001mol/L，稱取0.24g硫酸鐵銨，用1mol/L硫酸溶解，用水稀釋至500mL。
2，2'-聯吡啶:0.004 mol/L，稱取固體物質，用少量無水乙醇溶解，用水稀釋至250mL。
1摩爾/升氟化鈉標準溶液。
1.2測試方法
用移液管將10ml E3+標準溶液和壹定量的VC標準溶液轉移到50mL比色管中，加入10ml PH3三氯。
乙酸溶液，然後加入壹定量的2，2’-聯吡啶溶液和1mol/LNaF溶液1 00mL，用水稀釋至50mL，搖勻。
在室溫下靜置65438±00分鐘，然後放入65438±0cm比色皿中，在分光光度計上以試劑空白為參比，在520 nm波長處進行測量。
吸光度
2結果和討論
2.1測量波長的選擇
按檢驗方法，試劑為空白，顯色溶液在400~600 nm範圍內。
偶爾會畫吸收曲線，如圖1。結果表明，最大吸收波長為520 nm。
實驗中選擇520 nm作為測量波長。
2.2顯影劑的添加量
實驗結果表明，0.004 mol/L的2，2’-聯吡啶的用量為8.0 ~ 10.0。
在mL範圍內，吸光度達到最大值並穩定。這種方法的劑量是9毫升。
2.3反應時間和溫度的影響
分別考察了反應時間和溫度對體系吸光度的影響，結果見表。
常溫下，5~10min內可完全顯色，100min內可顯色。
反應溫度為65438±00分鐘。
2.4從試劑的選擇上
加入5mL CTMAB時，對2，2’-聯吡啶-Fe2+-VC形成的絡合物的吸光度和吸收波長無明顯影響，但加入時，
三乙醇胺可以增加顏色體系的吸光度。
2.5掩蔽劑和劑量的選擇
實驗中發現，經抗壞血酸還原後的Fe3+也能與2，2'-聯吡啶形成有色配合物，並能被光還原。
被還原成Fe2+和2，2’-聯吡啶的絡合物，所以需要用掩蔽劑掩蔽剩余的Fe3+。本實驗選用1mol/L。
NaF溶液作為掩蔽劑，進壹步研究表明0 25mL以上的1mol/LNaF溶液可以達到掩蔽效果，所以本文選用它。
使用1毫升1摩爾/1納夫溶液作為掩蔽劑。
2.6標準曲線的制備
根據試驗方法，測定標準系列的顯色。結果表明，VC的質量濃度在0.088 ~ 7.0 mg/L範圍內與啤酒相符。
113劉羽琦，楊銳，楊勇:分光光度法測定藥品和食品中的微量VC。
法律；回歸方程為:a = 0.00325+231.49 . 45503 c(mol/L)，相關系數為0.999991；表觀摩爾吸收系數ε =
2 40×104 l mol-1cm-1。
2.7幹擾離子的影響
當相對誤差控制在5%以內時，下列物質的倍數不幹擾1.0 mg/L抗壞血酸的測定:Na+，
Cl-，K+，NO3-，Zn2+(1 000倍)，Mg2-，SO42+，Al3+(500倍)，I' (1倍)，維生素B 1，維生素(65438+。
常見離子中的Ca2+(1 000倍)和Ba2+對抗壞血酸的測定有幹擾，但壹般比較樣品中Ba2+和Ca2+的含量。
低。壹般不需要分離處理，可以直接測定。1mol/LNaF的1mL可以掩蔽Fe3+，體系選擇性好。
2.8樣本分析
樣品制備和測定分析
1)VC片。將壹瓶VC白片和壹瓶VC黃片倒入玻璃研缽中研磨。充分混合後，準確稱量VC。
0.019 841克白色藥片和0。0138將6 g黃色片劑置於兩個100mL容量瓶中，然後用pH為3的三氯乙酸溶液浸提至定容。
搖動使粉末分散約1~2min後，立即用幹燥濾紙過濾，棄去壹次濾液，精確轉移1的濾液。50毫升到50毫升。
按試驗方法測定比色管中的體積，結果見表1。
表1片劑中維生素C含量的測定結果(n=6)
標簽。1含量測定結果
維生素C藥片(n=6)
用該方法測得的樣品值為g/100 g添加量/μg回收率/% RSD /%。
VC膠片68 0290 102 80 701
VC色情57 89 89 103 70 325
表2食物中維生素C含量的測定結果(n=6)
標簽。2含量測定結果
食物中的維生素C(n = 6)
樣品添加/μg回收率/% RSD /%
蜜猴桃0.238g/100g 0.200 98.20 541
黃瓜10.03mg/100g 0.200 104.9 1.41。
鮮橙58.50mg/100ml 0.200 96.3 1.08。
2)食物樣本。稱去皮獼猴桃。
30.8539克和25.4258克黃瓜泡在壹塊。
定量pH 3三氯乙酸溶液，搗碎
搗碎、混合和過濾。拿過濾後的獼猴來說。
500毫升容量瓶中的桃子汁，黃瓜
將濾液置於100mL容量瓶中，使用
用pH 3的三氯乙酸溶液稀釋至刻度。足夠了。
搖動1~2min，立即用幹濾紙過濾。
初級濾液和獼猴桃濾液分別精確轉移。
1 00mL和黃瓜濾液5 00mL。
用mL比色管定容，按試驗方法進行。
結果如表2所示。
3)飲料。取出10 00毫升新鮮橙汁。
放入壹定量的pH值為3的三氯乙酸溶液
在100mL容量瓶中，用pH值為3的三氯乙酸溶液稀釋至刻度，充分搖勻1～2min，準確移去2 50mL濾液。
根據測試方法在50毫升比色管中測定體積，結果如表2所示。
3結論
1)從表2可以看出，獼猴桃含有豐富的維生素C，所以在日常生活中要多吃這種水果，以補充身體健康。
身體所需的營養物質。
2)根據表1和表2中方法的精密度、回收率和標準曲線的線性關系，用分光光度法測定抗壞血酸。
是可行的。但由於抗壞血酸本身的不穩定性，很容易降解，所以在樣品處理時要註意盡快搗碎樣品。
在緩沖溶液中浸提。
3)水果中所含的鐵以有機物的形式存在，不直接與2，2'-聯吡啶絡合，不會影響測定結果。水果
樣品中的VC在空氣中容易被氧化，因此在處理樣品時必須使用保護劑來防止VC被氧化。草酸不能用作保護劑，因為草酸有
還原性，該方法使用三氯乙酸緩沖溶液作為保護劑。
參考資料:
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Xi長生。磷鉬藍分光光度法測定維生素C[J]。光譜學與光譜分析，2001，21(5): 723-725。
(上接103頁)
綜合方程的R2更接近1；F的臨界值是6.42，這個方程的F值是30.59。p值減小，表明回歸方程成立
方程表明，δE(H-L)、Q(C5)和EL對藥物活性有很大影響。活動參數(pIC50)
的值越大，藥物對受體的活性越好。從方程中可以看出，δ E (H-L)越小，Q(C5)被修正的越多(即負電荷越少)。
藥物的活性更強。由此可見，δ E (H-L)和Q(C5)可能是決定藥物活性的主要因素。EL2也影響藥物的活性。
有壹定影響，但系數小，影響小。
3結論
通過對燈盞花素ⅰ及其衍生物前線分子軌道的分析和構效關系的計算，定量結果表明當使用燈盞花素ⅰ及其衍生物時，
當花青素ⅰ及其衍生物作用於受體時，δE(H-L)和Q(C5)是決定藥物活性的主要因素。
顯示pIC50與量子化學參數之間關系的關聯式為類似衍生物的生物活性提供了壹種簡單可行的預測方法。
方法。
參考資料:
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周韻。燈盞花素及其衍生物的合成和初步生物活性[D]。上海:第二軍醫大學藥物化學，2002，7-19。
115 No.3劉羽琦，楊銳，楊勇:分光光度法測定藥品和食品中的微量VC
分光光度法測定紅棗中的維生素C
元、真、歐賢紅
(廣西南寧廣西中醫學院530001)
目的:建立大棗中維生素C的含量測定方法。方法:用醋酸從大棗中提取維生素C。
亞甲基由維生素C形成，其吸光度在490 nm處測量。結果:維生素c標準溶液的濃度為8~
在16μg/ml範圍內線性關系良好(r=0。999 7)，平均回收率為99。76%.大棗含有維生素C 4。752.
Mg/g，與傳統的碘量法相比，測定結果基本壹致。結論:該方法簡便、可靠、重現性好。
是壹種測定大棗中維生素C含量的方法。
關鍵詞:大棗；維生素c；分光光度法
中國圖書館分類號:R927。2文件識別碼:A文號:1000-2219(2006)02-0041-03。
棗屬鼠李科棗屬植物。
幹燥成熟的果實有補中、養血、安神的功效[1]。
紅棗富含維生素C、山楂酸和環磷酸腺苷。
用分光光度法測定了紅棗中維生素C的含量，並得出了結果。
好成績。
儀器和藥物測試
. 1儀器安捷倫8453紫外-可見分光光度計
美國)；梅特勒AE100電子分析天平(瑞士)。
. 2試驗藥物大棗由廣西南寧制藥公司提供，年生產。
西關陽是我院中醫鑒定科鑒定的。維生素C
r(四川成都科龍化學試劑壹廠生產，批號
50426)。硫酸鐵銨AR(四川成都科龍化學試劑I)
生產，批號040130)，用蒸餾水配制成0。003在實驗中。
Ol/L溶液。醋酸氬(國藥化學試劑有限公司
生產，批號20050519)，用蒸餾水配制成1。2在實驗中。
Ol/L溶液。硫酸氬(廣西師範大學化學試劑廠
生產，批號200406101)，實驗中用蒸餾水制成500。
信用證/信用證解決方案。2，4-二硝基苯肼AR(中國醫藥集團
海洋化學試劑公司生產，批號T2002061)，用於實驗。
00 ml/L硫酸溶液變成1 ml/L溶液，過濾，不需。
放入冰箱，每次使用前過濾。醋酸鈉氬(中等)
上海醫藥集團化學試劑公司生產，批號。
20041105)。pH值為6的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液。0，由以下內容組成
將9 g乙酸鈉和3 ml乙酸混合，最後用蒸餾水稀釋至
長度
方法和結果
1參考溶液的制備用乙醇2處理維生素C原料。
袁(1973-)，男，博士生，講師。
二次重結晶，真空度60 mmHg，50℃幹燥至恒重，符合
《中華人民共和國藥典》(2005年版)規定用碘量法測定。
內容是999。70克/千克。準確稱量凈化和幹燥後的尺寸。
原始元素C 10 mg，置於100 ml容量瓶中，用蒸餾水定容，
搖勻，制成100μg/ml維生素C水溶液。
2.2試液的制備稱量10。去核鮮棗00克，
放入研缽中，加入少量1。2 mol/L醋酸溶液，研磨過濾。
用1反復洗滌濾渣和砂漿後。2 mol/L乙酸溶液，濾渣和灰漿反復洗滌。
將所得濾液離心，並將所有離心濾液轉移至200 ml。
容量瓶，用蒸餾水定容。
2.3標準曲線繪制分別精確移動到100μg/ml尺寸。
2.0、2.5、3.0、3.5和4.0毫升的蘇生C標準溶液裝在25毫升中。
向容量瓶中加入5ml pH = 6的乙酸-乙酸鈉緩沖液。
將溶液搖勻，然後加入2。0 ml0。003摩爾/升硫酸鐵銨。
搖動溶液後，添加1。5 ml1ml/L 2，4-二硝基苯肼。
將溶液搖勻，最後用蒸餾水定容至25 ml。立即放置
在37℃的水浴中，反應在恒溫下進行2小時。冷卻後，在安捷倫
8453紫外-可見分光光度計，波長為490納米
確定吸光度。維生素c含量與砷吸光度的關系
見表1。
表1維生素C含量與吸光度的關系
數體積(毫升)濃度(微克/毫升)吸光度
1 2.0 8 0.149 3
2 2.5 10 0.318 7
3 3.0 12 0.472 0
4 3.5 14 0.608 2
5 4.0 16 0.767 8
在吸光度(a)和濃度(c)之間進行線性回歸以獲得回歸。
等式A=0。076 32c-0。452 7，相關系數r=0。999 7.
40
結果表明，維生素C在8～65438±06μg/ml範圍內呈線性關系。
很好。
. 4測試條件
. 4.1酸度的影響:用乙酸和乙酸鈉制備了壹系列酸。
其余的緩沖溶液用標準曲線項操作，結果顯示緩沖溶液緩慢
溶液的pH值在5的範圍內。0-6.8，得到最大吸收峰。
在490 nm處，吸光度最大且恒定。選擇在這個實驗中
H=6乙酸-乙酸鈉緩沖溶液。
. 4.2乙酸-乙酸鈉緩沖溶液的量:與標準曲線相同。
操作:加入3 ~ 9ml pH = 6的醋酸-醋酸鈉作為緩沖溶液。
，吸光度基本保持不變，本實驗選用5 ml。
. 4.3硫酸鐵銨用量:根據標準曲線操作，改變硫。
銨鐵的用量分別為1.0，1.5，2.0，2.5，3.0。
l .結果表明，硫酸鐵銨的適宜用量為2。0毫升。
在1範圍內。5~2.5 ml，吸光度保持穩定)
. 4.4 2，4-二硝基苯肼溶液的用量:同標準曲線項。
2，4-二硝基苯肼的用量為0。5, 1.0, 1.分別為5。
。0, 2.5毫升.結果表明，適宜的劑量為1。5毫升。
在1範圍內。0~2.0 ml，吸光度保持穩定)
. 4.5反應溫度:當溫度低於30℃時，反應就會發生。
完全同意。當溫度上升到37℃時，吸光度趨於最大值。
7℃後，吸光度趨於穩定。
4.6成品反應時間:1.0，1.5，2.0，2.5，3.0 h
端和端的吸收光度分別為0.483 1，0.502 6，0.608 1。
0.608 0, 0.608 1。結果表明，光吸收在2 h反應結束時
程度達到最大，相對穩定。
2.4.7 ***儲存物質的幹擾效應:對於9維。6微克/毫升。
生物元素C的量，下列* * *離子或物質(毫克)不幹擾(相對
誤差≤5%):蔗糖(12。0);葡萄糖(6。0);果糖
(4.0);蛋白質(5。0);鈣離子、鎂離子、鉀離子、鈉離子(4 .0);
天冬氨酸、蘇氨酸和酪氨酸(8。0);維生素B2(1。0);
煙酰胺(2。0);山楂酸(1。1);環磷酸腺苷(2。5);檸檬
檸檬酸(0。9);酒石酸(2。1).
2.5精密度試驗:準確轉移6份對照溶液，每份
2.根據標準曲線測定l，RSD為。
0.09% (n=6)，表明精密度良好。
2.6再現性試驗準確取出6份供試品溶液，每份壹份。
1.5 ml於25 ml容量瓶中，以下操作均按照標準曲線項進行。
測定吸光度並計算含量，RSD為0。23% (n=
6)，表明重現性好。
2.7精密轉移對照品溶液至2。5m，並按l。
每0次測量1次的吸光度。5 h通過標準曲線操作，結果表明。
相對標準偏差為0。2%(n=6)，至少穩定2。5小時..
2.8回收率試驗采用樣品回收法。取測試溶液
0.2 ml於25 ml容量瓶中，然後精確加入對照品。
100，200，300μg，其余按標準曲線操作。見表2。
表2回收率測定結果
通過將維生素C的量(μg)加入到編號的樣品中來測量總維生素含量(μg)。回收率(%)為平均回收率(%)，RSD(%)。
1
2
三
四
五
六
47.52
47.52
47.52
47.52
47.52
47.52
100
100
200
200
300
300
146.62
148.31
246.89
245.56
346.92
348.02
99.10
100.79
99.69
99.02
99.80
100.17
99.76 0.667 7
表3紅棗中維生素C測定結果的比較
編號分光光度法
測量值(毫克/克)平均值(毫克/克)
碘量法
測量值(毫克/克)平均值(毫克/克)
平均值的相對差值
(% )
1 4.746 4.718
2 4.749 4.722
3 4.758 4.752 4.731 4.724 0.593
4 4.747 4.711
5 4.757 4.724
6 4.755 4.738
9棗中維生素C的測定準確轉移1。5毫升
試液置於25 ml容量瓶中，***6份，以下操作相同。
準曲線項，確定樣品的吸光度，並確定樣品的平均吸光度。
0.635±3，RSD=0。23% (n=6)。吸收普通光線
代入回歸方程A=0。076 32c-0。452 7，我們得到c=
4.256μg/m，l表示棗含有維生素C 4。752毫克/克..
. 10對分光光度法和傳統碘量法的結果進行了比較。
不要測定紅棗中維生素C的含量來比較。結果基本壹致。
平均相對誤差為0。593%.見表3。
3討論
目前測定果蔬中維生素C含量的方法比較通用。
使用電位滴定法[2]和碘量法[1]，但是所有這些方法
這些方法都存在標準溶液標定繁瑣、操作程序復雜、耗時長的缺點。
點。作者根據Fe3+將維生素C氧化成脫氫抗壞血。
酸、脫氫抗壞血酸和2，4-二硝基苯肼反應生成。
基於抗壞血酸的含量與砷的量成正比的原理
分光光度法直接測定紅棗中的維生素c。本方
方法和傳統的碘量法測定紅棗中維生素C的含量。
結果基本壹致，因此該方法的結果是可靠的。此外，操作該方法
該方法簡單，重現性好，克服了碘量法的缺點。