以2.2000轉/分鐘離心65438±00分鐘，去除紅色上清液，再次用細胞裂解物洗滌細胞，然後用PBS重懸細胞。
3.稀釋單細胞懸液，取壹小部分計數有紐鮑爾腔的細胞。
4.用PBS重懸細胞，達到40μl PBS中1萬細胞的比例(1萬二倍體哺乳動物含有約10μ g基因組DNA)。
5.用PBS配制2%低熔點瓊脂糖溶液，並保持在50℃。
6.室溫下將細胞懸液與同體積的瓊脂糖溶液(每份65438±0毫升)混合，立即倒入凝膠塊模具中。
7.靜置20分鐘後讓瓊脂糖凝固，用無菌塑料杯(壹般用於滅菌)將凝膠塊從模具中取出放入蛋白酶緩沖液中，加入2mg/ml蛋白酶K..
8.將帶凝膠塊的蛋白酶K緩沖液在50℃保存2 ~ 3天。每個含有50毫升蛋白酶緩沖液的Falcon試管最多可容納100個凝膠塊。
9.經蛋白酶K消化後，凝膠塊可保存在此緩沖液或0.5mol/L EDTA溶液中，4℃。
10.此外，繼續用高壓滅菌的TE緩沖液洗滌凝膠塊的步驟數次。
11.將凝膠塊放入含有TE和0.04毫克/毫升PMSF溶液的Falcon試管中以滅活殘留的蛋白酶K..
12.室溫下用TE溶液沖洗凝膠塊數次，將凝膠塊放入另壹個幹凈的試管中，可直接用於酶切反應或0.5 mol/L。
EDTA，(pH8.0)4℃保存凝膠塊。
13.如果凝膠塊用EDTA保存，取出後應在室溫下用TE溶液沖洗30 min×2次。