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RNA的提取方法

1.苯酚提取法:先用卵酶K和SDS破碎細胞,消化蛋白,再用苯酚和酚氯提取,高速離心後取上清液。獲得的DNA大小為100-150kb。

2.甲酰胺解聚法:如上破碎細胞,然後用高濃度甲酰胺解聚蛋白質與DNA的結合體,再透析獲得DNA,獲得約200 KB的DNA。

3.玻璃棒纏繞法:用鹽酸胍裂解細胞,將裂解液鋪在乙醇上,然後用鉤狀或U形玻璃棒在界面處輕輕攪拌,DNA沈澱纏繞在玻璃棒上。產生的DNA約為80kb。

4.異丙醇沈澱法:與1法基本相同,僅用2倍體積的異丙醇代替乙醇,即可去除小分子RNA(溶於異丙醇)。

5.表面活性劑的快速制備方法:用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細胞,然後用蛋白酶K或苯酚去除蛋白質,用乙醇沈澱或透析。

6.加熱法快速制備:96℃-100℃加熱五分鐘,然後離心取上清液,可用於PCR反應。

7.堿變性快速制備:先用NaOH 20分鐘,再加入HCI中和,離心後取上清液,含少量DNA。

擴展數據:

DNA提取的原理:

1,保證核酸壹級結構的完整性;

2.核酸樣品中不應有能抑制酶的有機溶劑和濃度過高的金屬離子;

3.其他生物大分子如蛋白質、多糖和脂質分子的汙染應減少到最低限度;

4.其他的核酸分子,比如RNA,也要盡可能的去除。

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