1．穿傳統無菌手術衣：手術人員洗手消毒晾幹之後，從已打開無菌手術衣包內取出無菌手術衣。雙手抓住衣領兩角，裏面朝向自己，找寬敞處將其充分抖開，看準袖筒入口，向上輕拋，雙手迅速伸進衣袖，兩臂向前平舉伸直，由巡回護士協助在後面拉緊衣帶，雙手伸出袖口，巡回護士進壹步系好領部、背部系帶，雙手交叉提起腰帶，巡回護士在背後接過腰帶並協助系好。
2．穿包背式無菌手術衣：包背式無菌手術衣穿衣法基本同上，只是當術者穿上手術衣、戴好無菌手套後，器械護士將腰帶傳遞給術者自己系紮，包背式手術衣的後頁蓋住術者的身後部分使其背後亦無菌。
註意事項
註意穿好手術衣後，雙手半伸置於胸前，避免觸碰周圍的人或物。不可將手置於腋下、上舉過肩或下垂低於腰部。
手術完畢還有接臺手術時，巡回護士協助解開身後衣帶，繞向前方抓住手術衣衣領，向前脫下衣服，手術人員順勢將手套套在腕部，右手指摳住左手手套翻折部將其脫下，左手指摳住右手手套內面將其脫下，噴消毒液重新穿手術衣。