2.1生產用細胞生產用細胞為人二倍體細胞。2.1.1細胞庫管理和驗證應符合《生物制品生產用動物細胞基質制備和驗證規範》。來自同壹批次工作細胞庫的1或以上細胞管，復蘇擴增後的細胞僅用於生產壹批疫苗。主細胞庫的細胞代數應控制在23代以內，工作細胞庫的細胞代數應控制在27代以內，生產用細胞代數應控制在44代以內。2.1.2細胞制備:來自工作細胞庫的細胞種子被連續培養和傳代培養，直到獲得足夠數量的細胞培養物。單層細胞用0.25%胰蛋白酶消化，均勻分散後以合適的接種率傳代培養，37℃貼壁或旋轉培養。2.2病毒種2.2.1名稱和來源用於生產的病毒種為脊髓灰質炎病毒ⅰ、ⅱ、ⅲ型減毒株；可以使用類型I、II、111的Sabin菌株，類型L、II和III的Sabin純化菌株，類型III的2個菌株或其它批準的菌株。2.2.2種子批的建立應符合《生物制品生產驗證用菌毒管理規定》的規定。2.2.2.1原種子批薩賓毒株，原毒株ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅱ均由病毒研制者制備並保藏。2.2.2.2的主種批稱為主種批，是在猴胎腎或人二倍體細胞上上傳1 ~ 2代原毒種制成的壹批成分均勻的病毒懸液。薩賓品系主種批傳代水平為SO 11；中ⅲ2株主要種子批的傳代水平為中ⅲ2 1代；ⅲ型輝瑞菌株的主要種子批次為RSO1。將2.2.2.3工作種子批中的L ~ 2代病毒種子上傳到人二倍體細胞中制備的壹批成分均勻的病毒懸液稱為工作種子批。2.2.3對於薩賓ⅰ型、薩賓ⅱ型、其他純化株和中ⅲ2株，病毒種子從原始種子批到工作種子批的傳代次數不得超過3代；Sabinⅲⅲ等純化品系，包括輝瑞品系，不得超過2代。用於制備生產用種子批的細胞應限於猴腎或人二倍體細胞。2.2.4種子批次中有毒種子的驗證除另有規定外，主要種子批次和工作種子批次應按如下方式進行全面驗證。2.2.4.1鑒別試驗:取ⅰ型、ⅱ型或ⅲ型單價脊髓灰質炎病毒抗血清適量及病毒樣品適量，在35 ~ 37℃中和1 ~ 2小時，接種Hep-2細胞或其他敏感細胞，在適當溫度(35 ~ 36℃)下培養，7天後判定結果。應該確定病毒類型。同時血清和細胞質控要陰性。病毒控制應該是陽性的。微量細胞病變法用於2.2.4.2病毒滴定。將病毒種子稀釋10倍。將Hep-2細胞或其他敏感細胞以各稀釋度接種病毒液，在適宜溫度(35 ~ 36℃)下培養，7天判定結果。病毒滴度應不低於6.5 lgccid /ml。應同時進行病毒參考滴定。2.2.4.3無菌檢查法(附錄壹)，應符合規定。2.2.4.支原體依法檢驗(附錄B)，應符合規定。2.2.4.5病毒外源性因子依法檢查(附錄C)，應符合規定。在這次檢查中，對2.2.4.6兔進行了病毒種類的檢查。如果不立即進行試驗，病毒種應保持在-20℃以下。至少5只體重65438±0.5 ~ 2.5kg的健康家兔，每只註射65438±0.00ml，其中皮內多註射65438±0.0ml，其余皮下註射。觀察3周後，成熟期存活動物數應不少於80%，無B病毒或其他病毒感染判定為合格。兔子24小時後死亡，疑似感染B病毒者要進行屍檢。神經組織和器官標本應留作調查用，腦組織用10%懸液。五只健康的兔子應以同樣的方法接種以供檢查。在2.2.4.7，最初的疫苗是用工作種子制成的，並接種於易感兒童(免疫前抗體滴度
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