血細胞分析儀是醫院臨床檢驗中廣泛使用的儀器之壹，是指分析壹定體積內血細胞數量和異質性的儀器。20世紀90年代以來，隨著電子技術、流式細胞術、激光技術、計算機技術和新型熒光化學物質在血細胞分析儀中的應用，血細胞分析儀的檢測原理不斷完善，測量參數不斷增加，檢測水平不斷提高。特別是在白細胞五分類技術上，已經發展到利用多種技術(如射頻、細胞化學染色、流式細胞術、熒光染色等)同時檢測壹個白細胞，然後用先進的計算機技術分辨和區分上述方法處理的細胞之間的細胞差異，綜合分析實驗數據，得到更準確的白細胞分類結果。為臨床疾病的診斷和治療提供了重要的實驗室依據。近年來。血細胞分析儀，可以對白細胞進行五類計數，得到了廣泛的應用。本文綜述了血細胞五分類測定的常用技術及其最新應用進展。
1血細胞五分類技術原理
1.1流式細胞儀
流式細胞術(FCM)是綜合應用光學、力學、流體力學、計算機、細胞生物學、分子免疫學等學科，使被測溶液流過測量區域，逐個檢測每個細胞的理化特性，從而對高速流動的細胞或亞細胞進行快速定量測量和分析的方法。
首先，待測細胞在處理或染色後被壓入流動室。同時，不含細胞的緩沖液在高壓下從鞘液管中噴出，鞘液管的群體方向與待測樣品的流向成壹定角度，使鞘液包裹在樣品周圍，高速流動，形成循環流動流。待測細胞在包裝下排成壹行，依次通過檢測區。在激光束的照射下，產生散射光和激發熒光。這兩個光源的信號分別反映了細胞體積的大小和內部信息。被光電倍增管接收後可以轉換成電信號，再將連續的電信號轉換成計算機可以識別的數字信號。經過計算機處理後，分析結果可以顯示在屏幕上。
為了保證細胞以單壹排列方式逐壹通過檢測區，鞘流技術被廣泛應用於流式細胞儀中。根據層流理論，由於兩種液體的流速和壓力不同。在某些條件下，樣品溶液和圍繞它的鞘溶液可以在流動中保持分離和同軸。同時，鞘流可以加速樣品溶液中顆粒的流動，並迫使其流動軌跡保持在流動的中心軸上，使細胞單排壹個壹個地通過檢測區，這就是所謂的流動聚焦原理。
1_2阻抗法
根據庫爾特原理，將不良導體的血液按壹定比例稀釋在等滲電解液中，在小孔電極兩側加恒流源。在負壓的作用下，稀釋後的血細胞通過小孔。當細胞通過橫截面時，由於電阻的增加，會產生相應的脈沖。脈沖的振幅與細胞的體積成比例，脈沖的頻率與細胞的數量成比例。這就是著名的庫爾特原理或可變電阻脈沖原理。利用庫爾特原理，可以有效區分淋巴細胞和單核細胞。
1.3激光散射法/多角度偏振光散射技術
根據光散射理論，當激光照射在流動室中流動的每壹個細胞時，由於細胞的物理特性，部分光從細胞以不同的角度散射。其中，前向小角度散射光的光強可以反映細胞體積；大角度散射光的光強可以反映細胞核、血漿復雜程度和細胞顆粒的信息；側向散射光的光強可以反映細胞膜、核膜和細胞質的變化。因此，可以根據細胞的光散射特性對細胞進行分類。激光光源產生的單色光束直接進入計數池的敏感區，對每個細胞進行不同角度(10 ~ 70度)的掃描分析，確定其散射光強，從而提供細胞結構和形狀的光散射信息。由於粗顆粒細胞的散射強度強於細顆粒細胞，光散射具有很好的分辨細胞顆粒形態和質量的能力。