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誰能提供液相色譜培訓的總結?

本次培訓主要講解以下六個方面:1。高效液相色譜原理和方法的發展;2.高效液相色譜的原理、結構、使用和維護;3.樣品制備;5.色譜柱的原理、選擇和維護;5.高效液相色譜的數據處理和定性定量分析:6.高效液相色譜在各個領域的應用由於高效液相色譜適用於分析沸點高、相對分子量大、不穩定的有機化合物、生物活性物質以及各種易受熱分解的天然產物,而這些化合物約占全部有機化合物的80%。因此,高效液相色譜具有廣泛的應用,對於有機監測非常重要。高效液相色譜儀的維護決定了工作效率,所以為了更好更快的完成監測工作,我們必須懂得如何維護儀器,當然也要學習壹些儀器的基本維護技巧。經常遇到的堵塞問題是由於管道內磷酸鹽緩沖液沈積造成的,解決方法是每次實驗後先用純水沖洗,再用甲醇沖洗。色譜柱是高效液相色譜儀器的核心部分,其質量直接影響樣品的分辨率。為了延長HPLC液泵的使用壽命,保持其輸液的穩定性,必須註意以下事項:1。防止任何固體顆粒進入HPLC液體泵體,因為灰塵或任何其他雜質會磨損HPLC液體柱塞、HPLC密封圈、HPLC液體筒和HPLC液體止回閥,因此應提前清除流動相中的任何固體顆粒。流動相最好在玻璃容器中蒸餾,常用的方法是過濾,可以使用微孔濾膜(0.2um或05um)等過濾器。2.流動相不應含有任何腐蝕性物質,並且含有緩沖液的流動相不應留在泵中,尤其是如果HPLC泵停止過夜或更長時間。如果含有緩沖溶液的流動相留在HPLC液體泵中,由於蒸發或泄漏,甚至僅僅是因為溶液靜止,可能會沈澱出微小的鹽晶體,這將像上述固體顆粒壹樣損壞HPLC密封圈和HPLC柱塞。因此,需要將純水泵入HPLC進行充分清洗,然後更換為適合HPLC色譜柱存放、有利於HPLC泵維護的溶劑(反相鍵合固定相為甲醇或甲醇和水)。

3.HPLC泵工作時,應註意防止溶劑瓶中的流動相流出,否則HPLC空泵運行時會磨損HPLC柱塞、HPLC密封圈或HPLC圓筒,最終液體泄漏。4.HPLC輸液泵的工作壓力不能超過規定的最大壓力,否則高壓密封圈會變形泄漏。5.應首先對流動進行脫氣,以避免HPLC泵中出現氣泡,氣泡會影響流動的穩定性。如果有大量氣泡,HPLC泵將不起作用。壹些常見故障的原因和解決方法也是要掌握的:1,無流動相流出,無壓力指示。原因可能是HPLC泵中有大量氣體。此時,可打開減壓閥,使HPLC泵以大流量(5ml/min)運行,以排出所有氣泡,或使用50ml註射器幫助抽取泵出口處的氣體。另壹個原因可能是HPLC密封圈磨損,需要更換。2.HPLC壓力的流速不穩定。原因可能是需要排除氣泡,或者單向閥內有異物。您可以取下HPLC單向閥,將其浸入丙酮中進行超聲波清洗。有時可能是濾砂桿中有氣泡或被鹽的微小晶體顆粒或繁殖的微生物部分堵塞。此時,取出砂濾棒,浸入流動相中超聲去除氣泡,或將砂濾棒(片)浸入稀酸(如4mol/L硝酸)中快速去除微生物或溶解鹽,然後立即清洗。3.HPLC壓力高的原因是管道堵塞,需要清理或清洗。壓力下降的原因可能是管道泄漏。逐段檢查堵塞或泄漏情況。管道中氣泡的存在會在色譜圖上造成尖銳的噪聲峰,嚴重時會降低分析靈敏度;當氣泡變大進入流路或色譜柱時,流動相流速會變慢或不穩定,基線會波動。因此,流動相必須提前脫氣,並註意在註射樣品前將樣品註射器中的空氣排出。該培訓還指導了色譜柱的選擇。只有選擇合適的色譜柱,才能得到好的色譜峰,才能達到好的定性定量分析。如果色譜柱在使用壹段時間後出現凹陷,也可以自行填充,即打開柱頭,用相同或相似的填料填充凹陷部分。汙染嚴重的柱子可以調頭使用,但必須斷開與檢測器相連的壹端,才能洗去汙染物。如果基線中仍有峰值,也可以挖出來,經常恢復。

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