患有凝血障礙的患者可能會出血或栓塞。凝血涉及凝血因子和血小板的激活。血小板事件可通過CBC計數、外周血塗片檢查、出血時間檢查和血小板聚集試驗進行評估。凝血因子的評估通常基於PT和aPTT。異常的PT或APTT可以通過使用校正實驗來確定它是否是由因子缺乏或抑制劑引起的。如果在校正實驗中校正了延長的時間,則進行因子檢測以識別缺少哪個因子。抑制劑包括某些因子的抑制劑和狼瘡抗凝劑,所以沒有糾正的要篩選。凝血檢查壹般用檸檬酸鈉抗凝管。下面是我給大家帶來的關於凝血檢測誤差來源的知識。歡迎閱讀。
凝血檢測的誤差來源
壹般誤差系數為1。PT和APTT檢測只是略有降低,不會影響凝血時間的延長。只有比正常範圍降低20%-40%,才會導致凝血時間延長。光學法的PT和APTT可能受高脂血癥和黃疸的影響,時間縮短。PF4可能存在於未正確離心的血漿中。當肝素被APTT監測時,PF4可以與肝素結合,產生縮短的假APTT。同時,FVIII是壹種急性期反應蛋白。如果患者處於急性炎癥期,FVIII可能急劇增加,導致APTT假性縮短。
2.凝血酶時間TT檢測誤差凝血酶時間是測量纖維蛋白原轉化形成(交聯)纖維蛋白的時間。纖維蛋白病、增加的FDP水平和異常蛋白可幹擾纖維蛋白的交聯,導致假TT延長。澱粉樣變可抑制纖維蛋白原轉化為纖維蛋白,也可導致TT延長。在壹些嚴重的疾病中,如肝素抗凝劑的存在,TT可以延長。
下面將詳細介紹實驗室中凝血特異性檢測的常見幹擾因素。1.抗凝劑比例不對。檸檬酸抗凝管中血液與抗凝劑的比例為9:1。填充不足或過多會導致凝血時間檢測異常。
當HCT大於55%或小於21%時,需要用以下公式進行修正:C = 0.00185 x(100H)XVC為3.2%檸檬酸鈉的量,H為HCT的值,單位為毫升(mL)。
v是血容量,單位是毫升。
2.從留置管或導管中采集的稀釋或抗凝血樣本的汙染可能會對檢測產生幹擾。凝血試驗的結果可能會受到樣本被沖洗或溶血的影響。如果有必要從內置導管采集血液,請避免從肝素化導管采集血液。如果必須從肝素化導管中采集,確保在采集前充分清洗。NCCLS標準建議使用5mL生理鹽水進行沖洗。采集前至少要用5mL或6倍導管死腔的量排出和丟棄。血管護理的標準和實踐指南建議死腔的使用應遵循制造商的說明。該指南還描述了不應從各種類型的內置導管、靜脈註射裝置和內置心血管或臍帶中采集血液。即使規定了新人的死腔,肝素化導管采集的樣本也容易被肝素汙染。所以最好從外周血采集,避免臂側采集肝素、水蛭素或阿加曲班進行註射治療。在凝血試驗之前,可以用多胺中和或去除肝素;然而,殘留的肝素可能會幹擾檢測。通過增強抗凝血酶活性,肝素抑制活化的FII、FX、FIX、FXI、FXII和激肽k。相反,重組水蛭素、達納肝素和阿加曲班僅抑制活化的FII。這些抗凝劑(肝素、重組水蛭素和阿加曲班)可延長APTT並幹擾凝血試驗,如因子試驗和狼瘡抗凝試驗。因子檢測會產生假降低,而狼瘡抗凝物會產生假陽性。
3.創傷性失血創傷性失血可導致人工凝血試驗PT和APTT縮短。這是因為內皮細胞釋放組織因子,過度激活凝血因子和血小板。正確的采集技術可以避免手術中組織因子的混合,從而避免人為幹擾。
4.類風濕因子的RF纖維蛋白溶解作用由纖維蛋白溶解酶介導,該酶將纖維蛋白凝塊降解為D-二聚體和FDP。纖維蛋白溶解也降解完整的纖維蛋白原並產生FDP。纖維蛋白原降解產物和纖維蛋白原降解產物稱為FDPs或FSPs。半定量或定量免疫測定用於檢測D-二聚體和FDP。乳膠凝集法:將患者血漿與塗有抗FDP抗體的乳膠顆粒混合。如果FDP存在,它會與乳膠粒中的FDP抗體結合。結合後,可以觀察到聚集體。不同稀釋度的患者血漿可以用半定量的方法測得,就是FDP效價。乳膠凝集試驗也可用於D-二聚體,不僅可由技術人員肉眼觀察,也可用凝血分析儀測定。ELISA法:定量ELISA檢測可用於FDP和D-二聚體。傳統的ELISA檢測方法比較準確,但由於分析時間長,不常用。現在也有自動化ELISA檢測(VIDAS,bioM?北卡羅來納州達勒姆的裏歐)。d-二聚體和FDP檢測的壹個重要幹擾是射頻幹擾。會導致假陽性結果。如果PT、aPTT、TT、纖維蛋白原都正常,D-二聚體、FDP的檢測增加,就有可能出現這種幹擾。
5.高脂血癥、溶血或血小板減少樣本的血小板聚集檢測是初級止血的關鍵組成部分。可以用富含血小板的血漿或全血進行。膠原蛋白、瑞斯特黴素、花生四烯酸、腺苷二磷酸、腎上腺素、凝血酶能刺激血小板,誘導聚集。對激動劑的反應可導致壹種血小板功能障礙。測量聚集的響應壹般基於樣品透光率的變化,並且測量血小板聚集會受到壹些因素的影響。脂質血液和溶血性樣品會使聚集難以檢測,因為它們降低了聚集的透射率的變化。血小板減少癥也會使聚集評估變得困難,因為低血小板計數本身會產生異常的聚集類型。
6.抗凝劑或狼瘡抗凝劑檢測的幹擾ISTH狼瘡抗凝劑小組委員會推薦了兩種狼瘡抗凝劑的敏感試驗,以評估不同凝血途徑的成分。這是基於凝血時間的dRVVT,基於APTT的白泥凝血試驗,稀釋凝血酶原時間(組織因子途徑抑制試驗)。狼瘡抗凝劑可延長磷脂依賴凝血的檢測時間。因為它與磷脂結合,幹擾磷酸酯在凝血級聯理論中的作用。狼瘡抗凝篩查使用低濃度的磷脂來提高靈敏度。任何篩查結果異常(延長)壹般都需要1:1的混合檢驗才能顯示凝血時間仍延長。確認實驗通常加入過多的磷脂,但凝固時間呈現縮短至正常的趨勢。血小板中和試驗(PNP)是凍融血小板提供過量磷脂的確認試驗。六方相的磷脂中和實驗也是基於同樣的原理?也就是說,在磷脂的六相相中,凝固時間可能不被校正。應該註意的是,根據試驗中磷脂的量,APTT可以延長也可以不延長。在許多抗凝試驗中,肝素(包括皮下註射小劑量肝素)可引起狼瘡抗凝試驗的假陽性結果。肝素抑制FII、X、IX、XI、XII和激酶k,因此PT、APTT等凝血時間延長,可被狼瘡抗凝藥幹擾。重組水蛭素、達納肝素和阿加曲班抑制活化因子II並延長凝血時間。在凝血試驗開始前,肝素可以用多胺去除或中和;然而,殘留的肝素會繼續幹擾檢測。香豆素抗凝樣品不影響狼瘡抗凝物的檢測結果
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