雨滴計算是基於百度搜索到的維生素C的不同測定方法。目前，維生素C的測定方法有很多報道，如熒光法、2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化學發光法、電化學分析法和色譜法。對實際樣品的測定結果令人滿意。為了解我國VC含量測定方法及其應用的現狀和發展趨勢，方法以“維生素C或抗壞血酸及測定”為檢索詞，對中國期刊網全文數據庫(CNKI)65438-2002年的理工科A、B、醫藥衛生專集標題進行檢索。從年代、作者地區、發表等級、樣本類型和測定方法等方面對維生素C含量測定的文獻數據進行了分析。結果核心期刊發表的文獻占總文獻的45.06%，其中光度學、電化學和色譜法分別占65.69%、65.438±08.63%和65.438±02.75%。復雜樣品的文獻占總文獻的45.06%，其中分光光度法占60.92%，色譜法占65438±09.54%，電化學占65438±00.34%。結論目前我國維生素C的測定仍以分光光度法為主，但近年來色譜法，尤其是高效液相色譜法的上升趨勢尤為明顯。1.熒光法1。原理樣品中被還原的抗壞血酸被活性炭氧化成脫氫抗壞血酸，然後與鄰苯二胺(OPDA)反應生成帶有熒光的喹喔啉。在壹定條件下，熒光強度與脫氫抗壞血酸的濃度成正比。食品中抗壞血酸和脫氫抗壞血酸的總量可以用這種方法測定。脫氫抗壞血酸和硼酸可以形成絡合物，而不與OPDA反應。以消除樣品中熒光雜質引起的幹擾。本方法最低檢出限為0.022g/ml 2 .適用範圍本方法適用於蔬菜、水果及其制品中總抗壞血酸的測定。3.註意事項3.1大多數植物組織都含有壹種氧化酶，可以破壞抗壞血酸。因此，抗壞血酸的測定應采用新鮮樣品，並盡快用偏磷酸鹽-乙酸提取液勻漿樣品，使其保持活力。C. 3.2有些果膠含量高的樣品不易過濾，可采用抽濾法過濾，先離心，再過濾上清液。3.3活性炭可以將抗壞血酸氧化成脫氫抗壞血酸，但也可以吸附抗壞血酸，所以活性炭的用量要適當準確，所以，用天平稱量。實驗結果表明，2g活性炭可將樣品中的還原型抗壞血酸完全氧化成脫氫形式，其吸附效果不明顯。2.2，6-二氯靛酚(還原VC) 1的滴定。原理:還原抗壞血酸還原染料2，6-二氯靛酚，在酸中呈紅色，還原後紅色消失。還原抗壞血酸。它本身被氧化成脫氫抗壞血酸。當無雜質幹擾時，壹定量樣品提取液中還原標準2，6-二氯靛酚的量與樣品中所含維生素C的量成正比。該方法用於測定還原型抗壞血酸，總抗壞血酸通常用2，4-二硝基苯肼法和熒光分光光度法測定。2.註意事項(1)所有試劑的配制最好使用蒸餾水；⑵滴定時，可同時吸取兩個樣品。壹個被滴定，另壹個作為參考，觀察顏色變化；(3)樣品進入實驗室後，應浸泡在已知量的2%草酸溶液中，防止氧化和維生素C的損失；⑷長時間存放的罐頭食品可能含有大量的低鐵離子(Fe2+)，所以要用8%的醋酸代替2%的草酸。此時如果使用草酸，低鐵離子可以還原2，6-二氯靛酚，會增加測定次數，而使用醋酸可以避免這種情況。⑸整個操作過程應迅速，避免還原型抗壞血酸氧化；[6]處理各種樣品時，如遇泡沫，可加入幾滴辛醇消除；(7)測定樣品溶液時，需要做空白對照，樣品溶液的滴定體積從空白體積中扣除。3)優點:簡單、快速、準確，適用於多種不同類型樣品的分析。缺點是不能直接測定樣品中脫氫抗壞血酸和結合抗壞血酸的含量，容易受到其他還原性物質的幹擾。如果樣品中含有色素，將很難觀察到滴定終點。在酸性環境中，抗壞血酸(還原型)可以將染料2，6-DCIP還原成無色的還原型2，6-DCIP，而抗壞血酸被氧化成脫氫抗壞血酸。氧化形式的2，6-DCIP在中性或堿性溶液中呈藍色，但在酸性溶液中呈粉紅色。因此，當用2，6-DICP滴定含有抗壞血酸的酸性溶液時，在抗壞血酸完全氧化之前，2。6-DCIP立即變成無色。壹旦溶液中的抗壞血酸被完全氧化，滴加稍過量的2，6-DCIP會立即使溶液呈現淡粉色或淡紅色，這是滴定的終點，說明溶液中的抗壞血酸剛剛被完全氧化。根據滴定過程中2，6-DCIP標準溶液的消耗量(ml ),可以計算出被測樣品中抗壞血酸的含量。氧化型2，6-DCIP常與還原型抗壞血酸在稀草酸或偏磷酸溶液中反應，即樣品溶於壹定濃度的酸性溶液中或萃取後，再用2，6-DCIP標準溶液滴定至終點。食品和生物材料中常含有其他還原性物質，其中壹些能還原和脫色2，6-DCIP。為了消除這些還原性物質對定量測定的幹擾，可以用抗壞血酸氧化酶進行處理。樣品中的還原性抗壞血酸被破壞後，用2，6-DCIP滴定樣品中的其他還原性物質。然後，將滴定非抗壞血酸還原性物質2，6-DCIP標準溶液的消耗量從滴定未經酶處理的樣品的總消耗量中減去，這是滴定抗壞血酸實際消耗的2，6-DCIP標準溶液的體積。由此，可以計算出樣品中抗壞血酸的含量。此外，可以利用抗壞血酸等還原性物質與2，6-DCIP反應速度的差異，通過控制樣品溶液在pH 1-3的範圍內，可以消除或減少其他還原性物質的影響。通常，在這樣的條件下，幹擾物質與2，6-DCIP反應，6-DCIP的反應緩慢或被抑制。生物液體(如血液和尿液)中抗壞血酸的測定比較困難，因為這些樣品中抗壞血酸的含量很低，而且有許多還原性物質幹擾。同時，必須提前進行脫蛋白。生物液體中含有巰基、亞硫酸鹽和硫代硫酸鹽，它們都能與DCIP發生反應。但是反應速度比抗壞血酸慢很多。樣品中巰基物質對定量測定的幹擾，通常可通過加入對氯汞苯甲酸(簡稱PCMB)來消除。3，2，4-二硝基苯肼法1。總抗壞血酸包括還原的、脫氫的和二酮古洛糖酸。樣品中被還原的抗壞血酸被活性炭氧化成脫氫抗壞血酸，然後與2，4-二硝基苯肼反應。該方法適用於蔬菜、水果及其制品中總抗壞血酸的測定。這個方法是比色法，因為是目前測定Vc的國家標準之壹，所以單獨評價，原理和以前的苯肼法差不多。首先將樣品中還原的V氧化成脫氫的V，然後與2，4-V結合，將芥子溶於硫酸後進行比色法。在最近的國家標準中，這種方法強調空白，每個樣品和標準系列都需要空白，從而消除了不同顏色和背景的誤差。實際測定楊梅汁中Vc時，操作時間長，操作要求嚴格，試劑多。就壹般實驗室而言，是目前可以采用的方法。四碘量法的原理1和維生素C包括氧化型、還原型和雙酮酸型。用碘滴定維生素C時，被滴定的碘被維生素C還原成碘離子，由於維生素C在滴定過程中被完全氧化，滴下的碘會以碘分子的形式出現。碘分子可以使含有指示劑(澱粉)的溶液呈藍色。也就是滴定終點。2.註意事項(1)出現紅棕色時減慢滴定速度。(2)以藍色為滴定終點。L-抗壞血酸(維生素C)測定試劑盒(酶法)1。它適用於食品、飲料和生物制品的檢測。2.比色法該方法用於檢測水果和蔬菜(如。水果和蔬菜制品(如番茄醬、泡菜、果醬、果汁)、嬰兒食品、啤酒、飲料、液體食品、粉末和烘焙劑、肉制品、乳制品、葡萄酒，以及動物飼料、藥物(如維生素制劑、止痛藥和退燒藥)和生物樣品中的L-抗壞血酸(維生素C)。3.分析物L-抗壞血酸不是定量的。所以壹定是維生素c提供的，壹般來自水果蔬菜。由於技術原因，L-抗壞血酸在食品工業中被用作抗氧化劑。它是壹種相對敏感的物質，L-抗壞血酸的檢測非常適合於對來自原始水果和蔬菜的加工食品的質量評價。L-抗壞血酸被用作藥物生產中的壹種成分，例如維生素產品和止痛藥，並且它也被用作動物飼料添加劑。脫氫抗壞血酸(x)+MTT-甲+H+XL-抗壞血酸+？O2 AAO——& gt；脫氫抗壞血酸+H2OX 5。特異性在給定的條件下，該方法特別針對L-抗壞血酸。合成的D-阿拉伯糖抗壞血酸/阿拉伯糖抗壞血酸可以作為抗氧化劑，也可以反應，但是反應速度慢。6.靈敏度測定的靈敏度為0.005吸光度單位，樣品體積為1.600 ml。這相當於樣品溶液中L-抗壞血酸的濃度為0.1mg/L/L。0.015吸光度單位的差異可導致0.3 mg/l的檢出限，最大樣品體積為1.600ml..7.線性測定的線性範圍為0.5 ugL-抗壞血酸(0.3mgL-抗壞血酸/l樣品溶液體積為1.600ml)至20 ugL-抗壞血酸(0.2gL-抗壞血酸/l樣品溶液體積為0.100ml) 8。可能存在0.005-0.010吸光度單位的差異。標準相對偏差(變異系數)約為1-3%。當分析測試數據時，有必要考慮L-抗壞血酸水溶液的不良穩定性，尤其是當重金屬離子或氧存在時。9.來自錯誤來源的幹擾和成分通常不會幹擾實驗。高濃度的酒精和D-山梨酸。必須通過添加甲醛來去除大量的亞硫酸鹽。乙酸抑制劑AAO金屬和亞硫酸鹽離子會導致L-抗壞血酸的自發分解。10.該套件包括1。磷酸鹽/檸檬酸緩沖液——pH值約為3.5；MTT 2。AAO(坑壞血酸-氧化酶)-每板約17 U AAO 3。PMS解決方案六。磷鉬藍分光光度法測定維生素C基於在壹定的反應條件下，維生素C能定量地將磷鉬酸還原成磷鉬藍，提出了壹種測定維生素C的新方法。該方法簡便、快速，適用於生物、藥物等樣品中維生素C的測定。準確度和重復性令人滿意。1適用範圍本標準適用於水果、蔬菜及其加工制品中還原型抗壞血酸(不含二價鐵、二價錫、壹價銅、二氧化硫、亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽)的測定，但不適用於深色樣品。2染料2，6-二氯靛酚的顯色反應表現出兩個特征。壹個是取決於它的氧化還原狀態和氧化程度。二是受其介質酸度的影響，在堿性溶液中呈深藍色，在酸性介質中呈淺紅色。含維生素C的酸浸出液用藍色堿性染料標準溶液氧化還原滴定，染料還原至無色。當達到滴定終點時，過量的染料在酸性介質中呈淺紅色。根據染料的量計算樣品中還原型抗壞血酸的含量。七。二甲苯-二氯靛酚比色法測定深色樣品中的還原型抗壞血酸。2測定原理:用壹定量的2，6-二氯靛酚染料與樣品中的維生素C發生氧化還原反應，過量的染料在酸性環境中呈紅色。用二甲苯萃取後，吸光度與染料濃度成線性關系。用殘留染料濃度差減法計算維生素C的含量。8.近紅外漫反射光譜法(NIRDRSA)於1965首次應用於復雜農業樣品的分析後，因其樣品處理簡單、分析速度快等優點，越來越受到分析界的重視。該方法已廣泛應用於石油、紡織、農業、食品、藥物分析等領域。在藥物分析中，NIRDRSA可用於定性鑒別和定量分析。維生素C是壹種不穩定的二烯醇化合物，藥典[3]中的含量是用碘量法測定的。我們采用近紅外漫反射光譜法直接測定維生素c的含量，樣品無需預處理，方法簡單可靠。這是因為光在近紅外光譜中的頻率與C-H、O-H、N-H等振動的和頻與各階倍頻的頻率壹致，所以可以通過有機物的近紅外光譜獲得分子中C-H、O-H、N-H的特征振動信息。由於近紅外光譜波段較寬，光譜重疊嚴重，無法用特征峰等簡單方法進行分析，因此需要借助計算機技術和化學計量學方法。本實驗采用偏最小二乘法(PLS)。首先利用校準集建立預測模型，然後將預測集視為未知樣本，根據預測模型進行預測。對於選定的光譜範圍，采用MSC(散射校正)預處理對25個樣本進行交叉驗證，即選擇壹個樣本，從校準集中去除該樣本對應的光譜和濃度數據，將光譜主成分數設置為1，循環叠代樣本數和主成分數。計算預測殘差的平方和，並確定所需的主成分數。主成分太小會丟失樣本信息，主成分太大預測殘差平方和最小，為2.029。因此，主因子個數為2，建立了最優PLS校正數學模型。九電位滴定法是1。原理:根據滴定時電池電動勢的變化來確定反應終點。鉑是指示電極。甘汞作參比電極E電池= E+-E-+E液體連接電位= EI2/I-+K(常數)2。原理(具體來說:)隨著滴定劑的加入，待測離子濃度會因化學反應而不斷變化；使得指示電極電位相應變化；導致電池電動勢相應變化；計量點附近的離子濃度突然變化；引起電位的突然變化，所以可以通過測量工作電池電動勢的變化來確定終點。3.計算公式:(同碘量法)wvc = c(I2)v(I2)m(VC)/m(VC)* 100% 4。優點:解決了滴定分析中遇到有色或渾濁溶液時無法指示終點的問題。線性電位滴定法分析抗壞血酸。維生素C片中抗壞血酸的分析，當量標示量為98.90% ~ 100.5%，相對標準偏差不大於0.48%，說明用線性電位滴定法分析維生素C片中抗壞血酸含量是可行的。十、分光光度法1。原理:維生素C在空氣中，特別是在堿性介質中，pH >: 5，很容易被氧化成脫氫抗壞血酸。脫氫抗壞血酸的內環斷裂，形成二酮古龍酸。脫氫抗壞血酸和二酮古龍酸能與2，4-二硝基苯肼反應生成硫酸可溶性鹽，在500nm波長處有最大吸收。根據樣品溶液的吸光度，可以從工作曲線中求出VC的濃度，從而得到VC的含量。原理:庫侖滴定屬於恒電流庫侖分析。電極反應產物作為滴定劑(電生滴定劑，相當於化學滴定中的標準濃縮液)與被測物質進行定量反應，滴定終點由指示劑或電位法確定。2.基本依據——法拉第電解定律:電解時，電極上化學反應的質量與通過電解池的電量Q成正比，即m=MQ/zF = MI t /zF 3..化學反應:陰極反應:2H+2e-=H2陽極反應:2I-=I2+2e- 4。終點指示:各種方法(1)化學指示劑-I2 (2雙鉑電極電流指示劑方法5。計算公式:Wvc=MvcQ/zFm: F -法拉第常數(96487C) Z -電極反應中轉移的電子數註:電解效率為100%。6.優點:1)不需要標準化試劑溶液，省略了大量標準物質。定時器，小鉑絲電極，易於實現自動控制。3)如果電流保持恒定值，電解時間可以大大縮短。4)電量易於控制和精確測量。該方法靈敏、準確。5)滴定劑來自電解過程中的電極產物，可實現容量分析中難以實現的滴定過程，如Cu+、Br2、Cl2等產生後立即與被測物反應。7.缺點(難點):要求電解過程中不發生副反應和漏電，哪怕只是在電解電極上進行生成滴定劑的反應。電流效率為100%。8.註:電流效率= I-樣品÷I-總量= I-樣品÷(I-樣品+I-容量+I-雜質)因為在實際電解過程中存在影響電流效率的因素，如雜質、溶劑、電極本身對電極的反應等。還受其他還原性物質、樣品色素的顏色和測定時間的影響。紫外快速測定法是基於維生素C吸收紫外光，對堿不穩定的特性，在243nm處測定樣品溶液與堿處理樣品溶液的消光值之差，通過查標準曲線即可計算出樣品中維生素C的含量。十三光電比濁法原理在酸性介質中，抗酸鐵和亞硒酸(H2SeO3 O3)能定量地進行氧化還原反應。1mol反鐵酸可將2mol亞硒酸還原為硒。在某些條件下，生成的硒元素在溶液中形成穩定的懸浮液。當抗高鐵酸的濃度在0-4毫克/25-50毫升範圍內時，該溶液產生的濁度與抗高鐵酸的含量成正比。通過在分光光度計上測量測試溶液的濁度，可以定量地確定抗壞的鐵酸。十四熒光分析的原理是，抗壞鐵酸被酸洗過的活性炭氧化成順式脫氫抗壞鐵酸，然後與鄰苯二胺縮合形成熒光化合物。樣品中其他熒光雜質的幹擾可以通過向氧化的樣品中加入硼酸來實現。脫氫抗酸鐵形成硼酸脫氫抗酸鐵絡合物，不與鄰二苯胺反應生成熒光化合物。通過這種方式，可以測定和校正其他熒光雜質的空白熒光強度。這是最近報道的壹種間接測定Vc的方法，其原理是被還原的Vc在酸性介質中能定量地將Cu2+還原為Cu+，並與SCN—-反應生成CuSCN沈澱。沈澱物在高速離心機下有效分離，仔細洗滌，用濃硝酸溶解，用原子吸收光譜法測定樣品中維生素C的含量。這種方法的實驗儀器價格昂貴，主要問題是操作過程中反應是否完全。沈澱物經過多次洗滌離心，非常容易帶來誤差。這種方法的優點是不受果蔬顏色的幹擾，有壹定的發展前景。根據實驗發現，這種方法的結果是低的。需要進壹步優化和完善。十六。納米金分光光度法測定維生素C的方法本發明公開了壹種納米金分光光度法測定維生素C的方法。在5mL比色管中，依次加入0.1-2.0ml濃度為95.64μ g/ml的Haucl4溶液和0.02-0.50mL濃度為1的Haucl4溶液。然後加入濃度為0.38 mg/ml的維生素C溶液0.001-2.0 ml，混勻，加入二次蒸餾水定容至刻度，充分混勻，在分光光度計上於520nm處測定吸收值，同時做空白試驗。本發明的測定方法簡單快速，所用儀器便宜。研究了測定維生素C的L-半胱氨酸修飾電極的制備方法和電化學行為，並將其應用於維生素C的測定，發現該電極對VC有明顯的電催化作用。在pH=10.0的NH4Cl-NH3 H2O緩沖溶液中，VC在L-半胱氨酸修飾電極上產生壹個靈敏的氧化峰。VC的峰電流與濃度在1.0× 10-3 ~ 1.0×10-6mol/L範圍內呈良好的線性關系，相關系數為0.9962，其最低檢出限可達1.0×10-。包括用I2或二氯靛酚(DPI)的氧化還原滴定。壹般來說，滴定是壹種快速、簡便、準確的技術，通過滴定劑與被滴定物質之間的等效反應，準確地確定被測物質的含量。DPI對維生素C具有良好的選擇性，是壹種理想的氧化劑。梅特勒-托利多儀器法的傳統滴定方法是人工滴定，根據指示劑顏色的變化來確定終點。通過測量滴定劑的消耗量，可以計算出待測物質的含量。手動滴定有很多缺點:手動控制誤差大，計算復雜，不同反應需要特殊的指示劑。梅特勒-托利多的自動電位滴定儀解決了這壹問題，通過測量滴定反應中的電位變化來確定終點，這是壹種全自動、快速且準確的方法。梅特勒-托利多的滴定儀配備了存儲卡軟件包。存儲有成熟的滴定方法，可以方便快捷地解決實際應用問題，稍加修改即可作為新的實驗方法。此外，還有雙光束殘留染料減法比色法、2_6_二氯靛酚鈉動力學分光光度法、中性紅修飾電極法、示波溴法、流動註射化學發光抑制法、以磷鉬雜多酸為顯色劑的快速檢測法、果蔬中抗壞血酸含量的溶解氧測定法等。
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