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菊花矮縮病類病毒病如何進行病害檢驗檢疫?

檢查方法主要有三種:(1)出芽。在指示植物菊花槲寄生(高度15 ~ 20 cm)的芽兩側嫁接待測植物的兩個莖插,去除芽接以上的植株部分。在22℃條件下,芽逐漸生長,4~5周後出現典型癥狀。(2)汁液接種法。根據癥狀來看,這種方法雖然簡單,但不如芽接可靠準確。(3)CSVd實驗室快速檢測方法。包括EPPO (OEPP/EPPO,1989)推薦的“雙向”聚丙烯酰胺凝膠電泳,該方法可在1d內完成,檢測結果準確可靠。寄主鑒定:菊花不同品種:菊花。簡歷。槲寄生嚴重矮化,葉片失綠(凱勒,1951);與矮化接穗嫁接的Misdtltoe品種在6周後產生皰疹樣、卷曲的葉子和黃色近圓形斑點。夏季斑點直徑可達7mm,冬季小很多,病株略皺。熊熊燃燒。黃金品種沿礦脈呈現分散的黃色變色;邦妮。Jean和Sunfire接種後2 ~ 3周無明顯癥狀。瓜葉菊:接種30天後,葉片上出現局部病變,但癥狀不穩定。體外穩定性:①鈍化溫度。95~98℃(霍林斯和斯通,1973)。②稀釋終點。10-3~10-5(霍林斯和斯通,1973).③體外存活期。2 ~ 3個月(Hollings.and.Stone,1973),在幹燥癥組織中,類病毒的感染力可持續2年以上,抗凍性可持續1年以上。分子生物學檢測:DIG-label.cRNA探針(Hataya,t .等人,1999),RT-PCR-ELISA(門澤耳,w .等人,2000)和實時檢測。RT-PCR已有報道,且靈敏度不斷提高。Mumford,R.A .等人(2000年)比較了三種方法的靈敏度和實時性。RT-PCR最敏感,比RT-PCR敏感100倍,比DIG-label.cRNA探針敏感1000倍。檢疫風險評估:該病的病原為菊花矮縮病毒,是菊花的毀滅性病害,死亡當年植株矮化55%。雖然沒有病毒載體,但可以通過受害菊花的枝條、插條、種子傳播,通過花粉傳播,對菊花生產危害很大。在季良進行風險評估時,風險值為6分,被列為低風險檢疫性有害生物。檢疫措施:用於繁殖的菊花插條必須按照EPFO.24的檢疫程序進行檢驗,無CSVd母株,且不超過三代(OEPP/EPPO,1989)。在開花階段,至少要觀察30株,或者觀察檢測10%甚至更多的菊花插條(OEPP/EPPO,1990)。
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