靈芝又名曹睿、曹植,是我國傳統珍貴的藥食兩用保健藥材。中醫藥對靈芝功效的研究由來已久。自古以來就被認為有起死回生的功效,是珍貴藥材中的極品。遠在周朝列子,就有“腐土上,有南靈芝”壹書。東漢神農本草經載有益心氣、寧心安神、養肝益氣、強筋骨、好氣色等功效。明代李時珍《本草綱目》對靈芝的描述是:“苦、平、無毒。主治:心結,益心氣。補充中國,增長智慧,念念不忘。長期吃,強身不老。靈芝是壹種真菌,屬於擔子菌、多孔菌科、靈芝屬。壹般靈芝和靈芝主要是入藥。研究表明,靈芝成分復雜,有效成分多,生物學功能廣泛,可治療多種疾病。本文綜述了靈芝的活性成分和生物活性,特別是靈芝多糖的生物活性和提取方法。1.1對靈芝有效成分和生物活性的研究證明,靈芝含有多糖、氨基酸、蛋白質、肽、甾體、有機酸、揮發油、油脂、生物堿、長鏈烷烴、我們的酶和無機離子。通過研究,不同品種的靈芝,同壹品種的不同生長階段,野生和人工栽培的靈芝含有不同的化學成分。1.1.1靈芝多糖(GLP)是靈芝的主要活性成分,GLP有多種,包括葡聚糖、雜多糖、半乳糖、甘露糖、巖藻聚糖、阿拉伯糖、阿拉伯木聚糖等。靈芝中多糖的含量因多糖的種類、提取方法和純度而差異很大。目前靈芝多糖有200多種,大部分是B-葡聚糖,少數是A-葡聚糖。多糖鏈由三個單糖鏈組成,是螺旋立體結構。它的三維結構類似於DNA和RNA。螺旋層主要通過氫鍵固定,分子量從幾百到幾十萬不等。除少數小分子多糖外,大部分不溶於高濃度酒精,溶於熱水。液體培養基和固體培養基中均有靈芝菌絲體分泌的胞外多糖。胞內多糖和胞外多糖都是有效多糖。靈芝多糖多為雜多糖,即除葡萄糖外,大部分還含有少量的阿拉伯糖、木糖、巖藻糖、鼠李糖、半乳糖、甘露糖等單糖。單糖之間存在(1 3)、(1 4)和(1 6)糖苷鍵。它們大多有分支,部分多糖含有肽鏈,分支密度高或面試鏈的多糖藥理活性壹般較高。靈芝多糖的結構中有許多糖苷鍵,這可能是其藥理活性強的原因。靈芝多糖是靈芝中最有效的成分之壹。因此引起了醫學科技工作者的重視,研究報告最多。現已知靈芝多糖具有廣泛的藥理活性,可提高機體免疫力,提高機體耐缺氧能力,消除自由基,抑制腫瘤,抗輻射,提高肝臟、骨髓、血液合成DNA、RNA、蛋白質的能力,延年益壽。靈芝的多種藥理活性都與大川靈芝多糖有關。1.1.2靈芝酸靈芝酸是靈芝的另壹種主要活性成分。靈芝酸是壹種三萜類化合物,其基本結構由幾個異戊烯組成,大部分是30個碳原子,部分是27個碳原子。靈芝酸有四環三萜和五環三萜兩種。從各種靈芝中已分離出100多種靈芝酸。靈芝酸是靈芝苦味成分的主要來源,可作為鑒別靈芝品種的依據之壹。不同種類的靈芝或同壹品種的培養基中培養的子實體在不同的生長階段靈芝酸的含量不同,所以苦味的程度也不同。壹般苦味的樓芝中靈芝酸的含量往往較高。日本非常重視靈芝產品和成品中靈芝酸的含量,認為靈芝酸含量高會提高靈芝產品的品質。靈芝酸具有很強的藥理活性,具有鎮痛、鎮靜、抑制組胺釋放、解毒、保肝、毒化腫瘤細胞的作用。它是靈芝的主要有效成分之壹。靈芝酸可抑制大鼠巨細胞釋放組胺,抑制血管緊張素轉換酶活性,降低血壓。靈芝酸還能抑制大鼠肝細胞中24,25-二氫羊毛甾醇合成膽固醇,可用於防治動脈粥樣硬化和心臟病。Jorgel等人從靈芝中提取的幾種靈芝酸具有細胞毒性,能殺死體外培養的肝癌細胞。1.1.3各種元素靈芝含有多種元素。不同品種靈芝中元素的種類和含量略有不同,人工栽培靈芝和野生柔韌果中元素的種類和含量也不壹致。等離子體發射光譜法(IPC)測定結果表明,靈芝提取物中含有25種元素,其中鈣、鎂、磷、鐵、鋅、銅、鎳、鈷、鉻、鉬、鋰、硼、釩、錫、鍺、鍶、鈦、硒等19種元素是人體必需或有益的。原子吸收光譜法(AAS)的結果表明,靈芝提取物粉末富含鈣(2330ppm)、鎂(2440ppm)、磷(45000ppm)、鐵(390ppm)、錳(156ppm)、鋅(55.3ppm)和鍺(25.0ppm)。已知鐵、鈣、鋅、錳有養血、益肝、補腎的作用。鋅、銅、錳、鋰等微量元素與活血化瘀、益氣安神的功效有關。微量元素鈦對預防心血管疾病有重要作用。此外,鍺、硒、錳、銅、鉬、鉻、鎳等微量元素與人體抗衰老和抗癌密切相關。在靈芝的菌絲體和發酵液中,磷的含量相當豐富,磷有安神的作用。靈芝對神經衰弱和頑固性失眠的療效與磷的作用密切相關。文獻報道擔子菌中有機鍺的含量高達800-2000 mg/kg,能抑制多種腫瘤的生長,調節免疫功能,所以有人認為靈芝中的有機鍺具有壹定的生理活性。但文獻報道靈芝中有機鍺的含量差異很大,不同產地的野生靈芝、人工培養的野生靈芝和野生靈芝中有機鍺的含量也不同。野生靈芝中有機鍺的含量普遍很低,有的甚至檢測不出來。壹位日本作者報道,不同地區、不同生長期靈芝的有機鍺含量為13-78ug/kg,但在水提取液中未檢出。這證明了靈芝水提物的生物學功能與鍺無關。中國醫學科學院藥物牽引研究所有人在深層發酵菌絲體的培養液中添加有機鍺,可以顯著提高菌絲體中有機鍺的含量。可見,對於栽培靈芝,無論是子實體還是菌絲體,都可以考慮根據人們的需要在培養基中添加某種成分,使靈芝中這種成分的含量得到顯著提高。1.1.4生物堿靈芝腺苷是壹種非常活躍的物質,是靈芝的主要有效成分之壹。靈芝含有腺嘌呤和腺嘌呤核苷,尿嘧啶和尿嘧啶核苷。靈芝具有多種腺苷衍生物,均具有較強的藥理活性,可降低血液粘度,抑制體內血小板聚集,提高血液供氧能力和加速血液微循環,提高血液對心臟和大腦的供氧能力。清水明等人報道,腺嘌呤核苷是靈芝水提取物抑制血小板聚集的有效成分。動物實驗表明,尿嘧啶和尿苷能降低實驗性肌強直小鼠的血清醛縮酶。靈芝中含有五種生物堿,其中壹種是γ-三甲基氨基丁酸,能延長窒息缺氧模型離體豚鼠心臟的存活時間,增加冠脈流量。1.1.5其他靈芝含有少量的蛋白質、肽和氨基酸。靈芝孢子中的脂質A可以降低膽固醇。靈芝孢子酸A具有降低轉氨酶的作用。靈芝、紫莖澤蘭、平菇中的稀醇醚和靈芝孢子中的孢子醚能增強肝部分切除小鼠的肝再生能力。靈芝纖維能降低膽固醇,預防動脈粥樣硬化、便秘、糖尿病、高血壓、腦血栓。於等從靈芝深層發酵菌絲體中分離出四種呋喃衍生物。藥理實驗表明,5-羥甲基糠醛具有抑制血小板聚集的作用。曾錫純等從當歸中分離出5-羥甲基糠醛,它可能是擴張冠狀動脈和提高小鼠心肌攝取銣的有效物質。此外,靈芝還含有多種長鏈脂肪酸、長鏈烷烴、類固醇和多種酶等。這些成分是否參與某些生理活動尚不清楚。1.2靈芝多糖1.2.1的生物活性以雙向方式調節靈芝對免疫系統的免疫作用:靈芝可促進抗病的特異性和非特異性免疫能力,但抑制疾病的過敏反應。它從兩個不同的角度加強了身體維持穩態和抵抗疾病的能力。這種雙向作用的詳細機制仍有待闡明。但可以認為,調節免疫功能,抑制過敏反應,也是扶正固本的重要內容。靈芝對支氣管哮喘等過敏性疾病有效,提示其可能具有抑制過敏反應的作用。雷等討論了對免疫抑制劑和抗腫瘤藥物引起的免疫功能的拮抗作用。結果表明,GLP的拮抗強度取決於這些藥物的免疫抑制程度,只有當這些藥物輕微抑制免疫反應時,GLP才具有完全的拮抗作用。1.2.1.1靈芝多糖對T細胞的作用;靈芝多糖在體外直接激活脾淋巴細胞,但激活水平低於ConA或PHA,增加了活性E-玫瑰花結的形成率。靈芝多糖在體外輔助ConA誘導的脾淋巴細胞轉化,促進活化T細胞增殖,遠高於ConA和靈芝多糖單獨作用T細胞增殖的總和。但當劑量超過壹定水平時,促進作用消失,甚至表現出抑制作用。靈芝多糖對不同品系小鼠脾細胞具有相似的活化增殖作用,對C3H、C57BL/6J、LACA、瑞士等品系小鼠脾細胞轉化具有顯著的協同作用。體內給藥還能顯著促進ConA對小鼠脾淋巴細胞的活化和增殖。靈芝多糖在體外能顯著促進ConA誘導的Th細胞產生淋巴因子IL-2和γ-IFN,但單獨用小鼠脾細胞刺激時僅有微弱的激活作用。當靈芝多糖超過壹定濃度時,Th細胞可以產生IL-2。其濃度低於脾細胞的拉出抑制濃度。靈芝多糖還能促進S180荷瘤小鼠IL-2的活性。靈芝和靈芝多糖在體外能明顯對抗氫化可的松和環磷酰胺對ConA誘導的脾淋巴細胞轉化和增殖的抑制作用。體內給藥後,攜帶S180腫瘤的小鼠的IL-2和-IFN的活性降低。靈芝多糖對正常成年小鼠和免疫功能下降的老齡小鼠表現出相同的活性。從靈芝中提取的三種靈芝多糖能顯著促進正常成年小鼠和正常ConA誘導的免疫功能下降的老齡小鼠脾淋巴細胞增殖,使老齡小鼠脾淋巴細胞增殖接近正常成年小鼠,表現出抗衰老作用。樹舌多糖能顯著增強甲基化細菌α-澱粉酶和弗氏不完全佐劑(M-BaA-IF)引起的遲發性過敏反應,這是由於該藥能激活非特異性T細胞,具有擴大的細胞免疫作用。樹舌成分BN3 C與ConA合用能顯著提高小鼠脾臟T細胞增殖,並部分對抗環磷酰胺對脾臟細胞增殖的抑制作用。靈芝多糖(GLP)是從靈芝培養物的菌絲體中提取的多糖。連續腹腔註射大劑量GLP(4個/mg,2mg/小鼠)5天,可抑制T細胞增殖、細胞表型表達、T細胞誘導IL-2和B細胞產生溶血素抗體。連續註射適量的GLP(0.1毫克/只,0.05毫克/只)5天,可明顯增強上述免疫力。說明GLP是壹種生物反應調節劑,可適量增強機體的細胞免疫和體液免疫功能,為臨床應用GLP治療免疫功能紊亂提供了理論依據。1.2.1.2靈芝多糖對B細胞的作用靈芝多糖能促進SRBC空斑形成細胞的形成,但對正常成年小鼠無明顯作用,但對免疫功能下降的衰老小鼠有明顯的促進作用。在體外,單獨使用靈芝多糖可以輕微激活B細胞。高斌等報道,刺五加多糖能提高荷瘤小鼠的NK細胞活性,與抗腫瘤作用有關。1.2.1.3靈芝促進巨噬細胞的吞噬作用,腹腔註射靈芝提取物可促進腹腔滲出物、巨噬細胞和多形核白細胞的積聚。靈芝與氯喹合用可改善氯喹引起的免疫抑制,顯著增強腹腔巨噬細胞系統的吞噬功能。腹腔註射靈芝可明顯增強巨噬細胞的吞噬功能和巨噬細胞溶酶體酶的活性,並存在劑量-反應關系。高斌等報道,靈芝多糖在體外可誘導小鼠腹腔巨噬細胞分泌IL-1樣物質,比對照組高約2倍。連續給予靈芝液和靈芝多糖,可提高小鼠腹腔巨噬細胞對雞紅細胞的吞噬作用。吞噬百分率和吞噬指數增加。1.2.2不同品種或同壹品種靈芝提取的抗腫瘤多糖,由於多糖的提取方法、種燈、純度不同,其抗腫瘤活性不同,有效劑量(相當於生藥)也有很大差異。口服多糖的有效劑量遠大於腹腔註射。在相同劑量下,口服多糖壹般不顯示任何活性,所以所有作者均采用腹腔註射。不同靈芝的不同多糖,抑瘤率不同,與生藥有效劑量相差幾十到幾百倍。日本學者從靈芝中提取的多糖對S-180肉瘤有抗腫瘤作用,能抑制腫瘤細胞的增殖。關宏昌等人發現靈芝多糖D6對小鼠艾氏腹水癌也有壹定的抑制作用。1.2.3對核酸和蛋白質合成的影響。蛋白質是生命的物質基礎,體內所有重要的生命過程都與核酸和蛋白質有關。壹些靈芝多糖可以促進核酸和蛋白質的生物合成。這可能對細胞物質代謝和能量代謝的調節產生積極影響,從而增強機體的抗病能力,促進患者的康復。這可能是靈芝扶正的機制之壹。靈芝多糖D6、銀耳多糖、糖和銀耳孢子多糖都能促進小鼠血清蛋白中H-亮氨酸摻入的更新率。進壹步研究證實,靈芝多糖D6和銀耳多糖也能促進小鼠肝臟蛋白質中H-亮氨酸的摻入,反映了肝臟合成蛋白質能力的增強。這兩種多糖的引入能促進H-胸苷摻入小鼠肝臟RNA,但不能促進H-胸苷摻入小鼠肝臟DNA,這似乎表明它們能促進轉錄過程,加速RNA合成,但對DNA合成沒有影響。靈芝多糖D6還能促進小鼠骨髓的蛋白質、RNA和DNA摻入H-Leu和H-TdR,但對Ehrlich腹水癌細胞的DNA摻入H-TdR無影響。靈芝多糖能顯著增加體外培養小鼠脾細胞核DNA和RNA的含量,改變胞內細胞核的超微結構,增加胞質和細胞核的平均截面積,降低核質比,促進細胞增殖。靈芝多糖能明顯促進混合淋巴細胞培養中脾細胞對[H]TdR的攝取,提高脾細胞DNA聚合酶A的活性。說明靈芝多糖可以通過誘導DNA聚合酶的產生,促進免疫細胞中DNA的合成和細胞增殖,加速免疫應答過程和異源性pit刺激的淋巴細胞轉化。靈芝多糖還能完全拮抗環孢素A、絲裂黴素C、氟尿嘧啶和阿拉伯糖對小鼠混合淋巴細胞反應的輕度抑制作用,部分拮抗氫化可的松對MLR的重度抑制作用。靈芝的壹種小分子多糖能促進H-尿苷摻入肝RNA的增加率為20.5%,促進H-胸苷和H-尿苷摻入骨髓RNA和DNA的增加率分別為48.7%和43.3%。因此,這些多糖可以促進肝病的恢復和骨髓造血。1.2.4從靈芝中提取的其他葡萄糖、雜多糖、肽聚糖具有降血糖作用。靈芝葡聚糖能刺激胰島素分泌,促進外周組織對葡萄糖的利用,對正常大鼠和高血糖大鼠有明顯的陳舊性降糖作用。抗輻射,促進骨髓造血功能:靈芝液具有抗輻射作用,能明顯降低Coγ射線照射小鼠的死亡率,延長平均存活時間。靈芝多糖D6能促進蛋白質合成,提高造血功能,誘導細胞色素p-450,有利於增強機體的防禦功能,提高機體維持穩態的能力。靈芝多糖能增強小鼠缺氧生存能力。靈芝制劑能降低機體和心肌的耗氧量,增加缺氧豚鼠冠狀動脈血流量,增加心肌ATP,改善心肌缺血缺氧。對缺氧引起的家兔缺血性心電圖改變有明顯的拮抗作用。提高小鼠的耐缺氧能力,延長缺氧小鼠的平均存活時間。我的畢業論文,呵呵!
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