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塞丁格與改良後塞丁格技術區別

塞丁格(Sanger)和改良後塞丁格(Modified Sanger)是兩種DNA測序技術,它們在原理和操作上有壹些區別。

塞丁格測序:

塞丁格測序,也稱為鏈終止法,是壹種傳統的DNA測序技術,最早由Frederick Sanger於1977年提出並獲得了諾貝爾化學獎。該方法基於DNA合成過程中的隨機停止,通過添加壹個可以停止DNA合成的二進制缺失核苷酸(dideoxynucleotide,ddNTP)到DNA鏈中,導致DNA鏈延伸的隨機終止。通過同時進行4種不同的反應,分別加入脫氧核苷酸(dNTP)和壹個特定的ddNTP(A、T、C或G),得到壹系列不同長度的DNA片段。然後,通過凝膠電泳分離這些DNA片段,並讀取其長度,從而獲得DNA序列信息。

改良後塞丁格測序:

改良後塞丁格是在傳統塞丁格測序的基礎上進行改進的技術,也稱為二代測序技術。這些技術的***同特點是在反應中使用熒光標記的核苷酸,並使用光學方法來檢測DNA合成的過程。常見的改良後塞丁格測序技術包括454測序、Illumina測序和Ion Torrent測序等。

與傳統塞丁格測序相比,改良後塞丁格技術有以下優勢:

更快的測序速度:改良後塞丁格技術可以同時測序數以百萬計的DNA片段,大大提高了測序速度。

更高的測序深度:改良後塞丁格技術可以獲得更高的測序深度,即同壹位置的DNA序列可以被多次測序,提高了測序的可靠性和準確性。

更低的成本:由於高通量和自動化的特點,改良後塞丁格技術的測序成本相對較低。

總結:

塞丁格測序是壹種傳統的DNA測序技術,基於DNA合成過程中的隨機停止,分析DNA片段長度獲得序列信息。改良後塞丁格技術是壹類二代測序技術,通過熒光標記的核苷酸和光學檢測來實現高通量、高速度、高測序深度和較低成本的DNA測序。

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