免疫學檢驗是檢驗技術人員的考點之壹。為了方便考生復習免疫學檢驗知識。下面是我給大家帶來的關於免疫學檢驗的知識。歡迎閱讀。
0.免疫學檢測技術是基於抗原抗體反應。
1，免疫:識別和排斥抗原性異物是機體的壹種生理功能。
2.免疫防禦(外部)；免疫穩態(預防自身免疫性疾病)；免疫監測(腫瘤預防)。
3.中樞免疫器官:骨髓和胸腺；外周免疫器官:淋巴結、脾(最大)和粘膜相關淋巴組織。
4.b細胞:通過識別膜免疫球蛋白結合抗原，介導體液免疫；b細胞受體= BCR =米格
表面標記:膜免疫球蛋白(SmIg)、Fc受體、補體受體、EB病毒受體和小鼠紅細胞受體。
成熟b細胞:CD19，CD20，CD21，CD22(成熟b細胞的mIg主要是mIgM和mIgD)同時檢測CD5分子，可分為B1細胞和B2細胞。
b細胞功能檢測方法:溶血空斑形成試驗(體液免疫功能)。
5.t細胞:介導細胞免疫。* * *相同的表面標記是CD3(多鏈糖蛋白)；輔助性T細胞的標誌是CD4殺傷T細胞的標誌是CD8t細胞受體=TCR。
T細胞和NK細胞相同的表面標誌是CD2(羊紅細胞受體)；
CD3+CD4+CD8- =輔助性T細胞(Th)
CD3+CD4-CD8+ =細胞毒性T細胞(Tc或CTL)(T細胞介導的細胞毒性試驗)
CD4+CD25+ =調節性T細胞(Tr或Treg)
T細胞功能試驗:植物血凝素(PHA)和刀豆(CONA)刺激T細胞增殖。增殖試驗包括形態學方法和核素法。
T細胞亞群的分離:親和平板結合分離法、磁性微球分離法和熒光激活細胞分離器分離法。
*E-garland試驗是通過檢測SRBC受體來計數T細胞的試驗；
6.NK細胞:具有細胞介導的細胞毒性。直接殺死靶細胞(腫瘤細胞和病毒感染細胞)
表面標誌:CD16(ADCC)，CD56。
K562細胞系常被用作測定人NK細胞活性的靶細胞，而YAC-1細胞系常被用於測定小鼠NK細胞活性。
7.吞噬細胞包括:單核細胞-吞噬細胞系統(MPS，表面標記CD14，包括骨髓中的前單核細胞、外周血中的單核細胞和組織中的巨噬細胞)和中性粒細胞。(MHCⅱⅱ類分子的表達)
8.人成熟樹突狀細胞(DC)(專職抗原提呈功能):表面標誌物為CD1a、CD11c、CD83。
9.免疫球蛋白可分為分泌型(sIg，主要存在於體液中，具有抗體功能)和膜型(mIg，作為抗原受體表達於B細胞表面，稱為smlg)。
10，免疫球蛋白按含量排序:IgG >；IgA & gtIgM & gtIgD & gt；五種類型的IgE(根據重鏈恒定區的抗原性(CH)分類)
免疫球蛋白含量的測定:單向循環免疫擴散法和免疫比濁法。
11，免疫球蛋白的同型抗原決定簇位於恒定區(CH，CL)。
抗體是由漿細胞產生的。抗體分子上的VH和VL(高變區)是抗原結合位點。
13、IgG:血清中含量最高的免疫球蛋白(IgG1最高)，是血液和細胞外液中的主要抗體。也是第二次免疫反應的主要抗體，是唯壹能通過胎盤的抗體。大部分抗菌抗體和抗病毒抗體是IgG，部分自身抗體和過敏ⅱ型抗體是IgG，免疫學檢測中的第二抗體主要是IgG。
14，IgA:血清型(單體存在)和分泌型；分泌型IgA(sIgA)是壹種性能穩定的二聚體，主要存在於胃腸道、支氣管分泌物、初乳、唾液和淚液中，局部濃度較高，是參與粘膜局部免疫的主要抗體。
15，IgM:五聚體，主要存在於血液中，是Ig(也叫巨球蛋白)中分子量最大的。首先由個體合成和分泌的抗體。抗原刺激後體液免疫反應中產生的第壹種抗體，感染時血清IgM水平升高，提示近期感染。如果新生兒臍帶血中IgM升高，說明宮內感染。
16，IgE:單體結構，在正常人血清中含量最低。IgE是壹種嗜細胞抗體，介導ⅰ型超敏反應。特異性過敏反應和早期寄生蟲感染患者血清中可升高。
17，補體:具有類酶活性的球蛋白(由肝細胞和巨噬細胞產生)；激活方式主要有三種:經典方式(以抗原結合的IgG或IgM抗體為主要激活劑(雙鏈DNA)，C1 ~ C9均參與)，替代方式(病原微生物的細胞壁成分(脂多糖)直接激活補體C3，進而完成C5 ~ C9的激活過程)，MBL方式(急性炎癥時產生的甘露糖結合凝集素(MBL)與病原結合。
18，在補語系統中C3含量最多，C2含量最少。
19.失活:56℃加熱30分鐘，補體失去活性。
20.補體清除免疫復合物的方式:吞噬和調理；免疫粘附；免疫復合物抑制。
21，完全抗原=反應性+免疫原性。半抗原=反應性(無免疫原性)
22.抗原和抗體的結合力(分子間引力):靜電引力、範德華力、氫鍵和疏水力(最強)。
23.抗原抗體反應的四個特征:特異性、可逆性、比例性和階段性；受反應條件(如溫度、pH、電解質、抗原抗體比等)影響。).
24.抗體前帶過多；抗原過量回帶(鉤效應)
25.抗原抗體反應可分為兩個階段:第壹階段是抗原抗體特異性結合階段，速度快，只需幾秒到幾分鐘，但無可見反應；第二個階段是可見反應階段，這個階段比較慢，往往需要幾分鐘到幾個小時。
26、顆粒抗原凝集反應。可溶性抗原出現沈澱反應。單價抗原結合相應的抗體而不沈澱。
27.木瓜蛋白酶水解IgG為2 fab+Fc；胃蛋白酶將IgG水解成F(ab)2+nFc。
28.弗氏佐劑是免疫動物最常用的佐劑。弗氏佐劑可分為弗氏完全佐劑(弗氏不完全佐劑加卡介苗)和弗氏不完全佐劑。
29.r(兔)抗血清是通過免疫兔子和其他動物產生的抗體。抗原抗體反應比的適用範圍廣，適合用作診斷試劑。
h(馬)抗血清是用馬等大型動物免疫獲得的抗體，抗原抗體反應的適宜範圍較窄，壹般用於免疫治療。
30.抗血清的常見保存條件:2-8℃；冷凍保存(最常用)；真空幹燥保存(5-10年)。
31，雜交瘤細胞放入液氮(-196℃)前需要逐漸冷卻。當細胞復蘇後，將凍存管從液氮槽中取出，立即浸入37℃水浴中。
32.凝集反應分為兩個階段:①抗原和抗體的特異性結合；②可見顆粒團聚。
33.直接凝集反應的原理是在適當的電解質(0.85%氯化鈉)存在下，細菌、螺旋體、紅細胞等顆粒抗原可直接與相應的抗體結合進行凝集。抗原=凝集素，抗體=凝集素。
34.玻片凝集試驗:主要用於抗原的定性分析和AB0血型的測定。
試管凝集試驗:肥達試驗、體外斐濟試驗、輸血交叉配血試驗；
35.紅細胞包被抗原檢測抗體的血凝反應，稱為陽性間接血凝反應(PHA)。
紅細胞包被抗體檢測抗原的血凝反應，稱為反向間接血凝反應(RPHA)。
36.間接血凝抑制試驗:可用於檢測抗體、自身抗體、過敏抗體和抗原。
37.金黃色葡萄球菌蛋白A
38.血凝試驗可在微量滴定板或試管中進行，標本按倍稀釋，壹般為1:64，不加標本的稀釋液設為對照孔。當紅細胞沈積在孔的底部並集中在壹個點上時，它們不會凝集。如果紅細胞凝集，則分布在孔底周圍。
39.明膠凝集試驗(間接):檢測HIV-1抗體和抗精子抗體。
40.抗球蛋白試驗，也稱為Coombs試驗，是壹種非常有用的檢測抗紅細胞不完全抗體的方法。包括直接抗球蛋白試驗(檢測紅細胞上的不完全抗體)和間接抗球蛋白試驗(血清中遊離的不完全抗體)。
41，沈澱反應分為兩個階段:第壹階段是抗原與抗體的特異性結合，可在幾秒至幾十秒內完成，出現溶解度小的復合物，肉眼不可見。第二階段是形成可見的免疫復合物，大約需要幾十分鐘到幾個小時才能完成，如沈澱線、沈澱環等。
42.免疫比濁法:最適pH為6.5 ~ 8.5，磷酸鹽緩沖液。
43.對流免疫電泳:抗體流向負極，抗原流向正極。
44、免疫固定電泳還用於檢測尿-周蛋白和？、?腦脊液寡克隆蛋白的分型、檢測和分型。
45、RIA(放射免疫分析)核素(125ⅰ)標記抗原，競爭性抑制(標記抗原與未標記抗原競爭有限抗體)；IRMA(免疫放射)核素標記抗體，非競爭性結合(標記抗體過量)，反應速度比RIA快，靈敏度明顯高於RIA。)
RIA可以檢測大分子和小分子抗原，但IRMA只能檢測至少有兩個抗原決定簇的抗原。
46.常用的熒光素有:異硫氰酸(FITC)黃綠色，最常用；四乙基羅丹明(RB200)為橙色；四甲基羅丹明異硫氰酸酯(TRITC)為橙紅色；藻紅蛋白是橙色的。其他:銪(Eu3+)
47.熒光標記蛋白質的常用方法:攪拌法和透析法。
熒光抗體效價的鑒定:當抗原含量為1g/L時，抗體效價>:1:16
48.時間分辨熒光免疫分析(TRFIA)使用鑭系元素化合物(如銪)作為熒光標記。
49.偏振免疫分析的偏振波長為485納米(藍光)。
50.辣根過氧化物酶(HRP):底物(1)鄰苯二胺(OPD)，和(2)四甲基聯苯胺(TMB)，它是ELISA中最廣泛使用的底物。
堿性磷酸酶:底物:對硝基苯磷酸(p-NPP)
？-半乳糖苷酶(？-Gal):底物:4-甲基傘形酮-R-D半乳糖苷(4-MUU)
51，異相法:先分離，後測定；均相法:不經分離直接測量。
52、酶聯免疫吸附試驗:
必要的試劑:①固體抗原或抗體；②酶標抗原或抗體；③酶反應的底物。
抗原測定:雙抗體夾心法(HBsAg)是最常用的蛋白質大分子抗原。對於只有單壹抗原決定簇的小分子，使用競爭抑制法。
抗體檢測:通常采用間接法(HCV、HIV)、雙抗原夾心法(HBsAb)、競爭法(HBcAb、HBeAb)和捕獲法(IgM)。
*待測孔最終顏色深淺與標本中待測抗原或抗體呈正相關:雙抗體夾心法、雙位點壹步法、間接法檢測抗體；
53.化學發光底物有:直接化學發光劑:吖啶酯和釕聯吡啶；酶促反應的發光劑:(標記酶HRP)魯米諾及其衍生物，(標記酶為堿性磷酸酶)AMPPD
54.多克隆抗體常用於蛋白質印跡實驗。
55.外周血單核細胞分離的分層液常用的有:Ficoll(血漿、單核細胞、顆粒、紅自上而下)和Percoll(死細胞、單核細胞、淋巴細胞、紅自上而下、顆粒)。
56.純淋巴細胞群的收集包括:粘附與黏附法、吸附柱過濾法、磁鐵吸引法、Percoll分離法。
57.T細胞和B細胞的分離:E-玫瑰花結沈降法和尼龍毛細管柱分離法。
58.淋巴細胞活力測定:臺盼藍染色法，死亡細胞呈藍色。
59.CD4是HIV受體，感染HIV時CD4/CD8比值明顯降低。
60.CD4/CD8的升高在自身免疫性疾病中很常見。CD4/CD8降低常見於病毒感染、惡性腫瘤和再生障礙性貧血。
61，(ELISA)雙抗體夾心法是細胞因子測定最常用的方法。
62.流式細胞儀:前向散射光(FS)反映顆粒大小。橫向散射光(SS)反映了顆粒內部結構的復雜程度和表面的光滑程度。熒光(FL)反映了粒子的熒光部分的數量。
63.免疫熒光技術中最常用的熒光染料:異硫氰酸熒光素(FITC)具有明亮的綠色熒光。德州紅-紅色熒光。藻膽蛋白發出橙色到紅色的熒光。
64.臨床上，CD3-CD16+CD56+淋巴細胞通常被標記為NK細胞。
65.艾滋病患者的壹個特征性免疫診斷指標是:T淋巴細胞總數減少，T細胞亞群的CD4Th/CD8Tc比值倒置，TH/TC
65.強直性脊柱炎HLA-B27
66.IgG和IgA的升高在SLE患者中更為常見。類風濕性關節炎患者主要是IgM升高。
67.m蛋白(MP)是B淋巴細胞或漿細胞的異常增殖(>:30g/L)是壹種異常的單克隆免疫球蛋白，其氨基酸組成和序列非常壹致。大部分沒有免疫活性，所以也叫輔助蛋白。臨床上多見於多發性骨髓瘤、高丙種球蛋白血癥、惡性淋巴瘤、重鏈病、輕鏈病等。
68、M蛋白——最基本的方法:血清蛋白區帶電泳技術。
m蛋白-粗篩試驗:血清免疫球蛋白定量(單向瓊脂免疫擴散法和免疫比濁法)
m蛋白-鑒定，首選方法:免疫固定電泳(IFE)技術(區帶電泳技術與特異性抗血清的免疫沈澱反應相結合)是臨床上最常用的方法。
69.IgD的降低見於原發性無丙種球蛋白血癥和矽肺。
70.腦脊液中濃度:IgG >；IgA & gtIgM .在神經系統腫瘤中，主要是IgA和IgM增加。
(感染、血管疾病、全身性疾病=升高=IgG)
71，β -peridin是尿液中的遊離免疫球蛋白輕鏈。尿中可測，血中陰性(由於β -peridin分子量小，容易迅速從腎臟排出，血中含量不增加)。
72.冷球蛋白又稱冷免疫球蛋白，在-4℃沈澱，37℃復溶。血液采集是冷球蛋白檢測的關鍵，采集靜脈血要在體溫下保存。
73.補體結合試驗(CFT)，梅毒診斷，華氏反應。
74.異質熒光免疫分析:時間分辨熒光免疫分析。
均相熒光免疫分析:熒光偏振免疫分析。
75.鏈球菌感染:ASO(乳膠凝集試驗，免疫散射比濁法)
76.傷寒沙門氏菌有細菌(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面(Vi)抗原。肥達反應，效價？1:80為正。
77.卡氏肺孢子蟲又稱卡氏肺孢子蟲，是壹種真菌樣的。
78.I型超敏反應:由特異性IgE抗體介導，發生速度最快。(青黴素、支氣管哮喘)
提高Th1細胞的活性，減少IL-4的分泌，可以減少IgE的產生，阻斷IgE介導的I型超敏反應。
參與I型超敏反應:肥大細胞、嗜堿性粒細胞和嗜酸性粒細胞。
79.ⅱ型超敏反應:又稱細胞毒性超敏反應或細胞溶解超敏反應，是靶細胞表面的抗原與相應的IgG或IgM抗體結合後，主要由細胞溶解或組織損傷引起的病理性免疫反應，有補體(細胞溶解)、巨噬細胞(吞噬)、NK細胞(ADCC)參與。(輸血反應、新生兒溶血、自身免疫性溶血性貧血、藥物過敏性血細胞減少癥、肺出血性腎炎綜合征、甲狀腺機能亢進)
80.ⅲ型超敏反應:可溶性免疫復合物沈積在局部或全身毛細血管基底膜上，通過激活補體，在血小板、嗜堿性粒細胞和中性粒細胞的參與下，引起以充血水腫、局部壞死和中性粒細胞浸潤為特征的炎癥反應和組織損傷。(Arthus反應、類Arthus反應、血清疾病、鏈球菌感染後腎小球腎炎、類風濕性關節炎、SLE)/81、ⅳ型超敏反應:又稱遲發型超敏反應(DTH)，是壹種以單核細胞浸潤和組織損傷為特征的炎癥反應，由效應T細胞和特異性抗原結合引起。(細胞免疫)效應子CD4+Th1細胞識別抗原後可釋放IFN-。、TNF、淋巴毒素(LT)、IL-3、GM-CSF、單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)等細胞因子。
常見的ⅳ型超敏反應疾病:感染性遲發型超敏反應(結核桿菌、病毒、原蟲)、接觸性皮炎、移植排斥。(結核菌素皮膚試驗和斑貼試驗)
82、變性IgG能刺激機體產生抗變性IgG抗體(類風濕因子)。
83.ITP患者血清中存在抗血小板抗體，可縮短血小板壽命。
抗乙酰膽堿受體抗體:對重癥肌無力(MG)有診斷意義。
85.毒性彌漫性甲狀腺腫患者血清中存在抗TSHR IgG自身抗體。(甲狀腺功能亢進)
86.多發性肌炎是壹種以肌肉損傷為特征的自身免疫性疾病。如果同時有皮膚損害，稱為皮肌炎。
87.75%的PSS患者抗核抗體陽性，抗Scl-70抗體是PSS的特異性抗體。80% ~ 95%的局限性硬皮病患者抗著絲粒抗體陽性。
88.自身免疫性疾病(AID)的特征:自身抗體滴度高，病理特征:免疫炎癥損傷與抗原分布壹致，可建立動物模型。
89.抗DNP抗體(抗核蛋白抗體)通常被DNA和組蛋白完全吸收，是形成狼瘡細胞的因素。
90.ANA陽性熒光現象可分為核膜型、均壹型、斑點型和核仁型。ANA通常是自身免疫性疾病的第壹個篩選試驗。
91，ENA是可提取核抗原的總稱，分子中不含DNA。
92.抗dsDNA抗體對SLE具有高度特異性。抗Sm抗體也是SLE的特異性標誌物之壹。這兩項往往是SLE的診斷指標。(對於疑似SLE的患者，應先檢測ANA和抗dsDNA抗體，當ANA和/或抗dsDNA抗體陽性時，再檢測抗ENA抗體譜。如果抗Sm抗體和/或抗RNP抗體陽性，在實驗室可診斷為SLE)
93.抗核RNP抗體:是MCTD(混合性結締組織病)的診斷指標。
94.抗SSA/抗SSB抗體:是幹燥綜合征(SS)的診斷指標。(當抗ENA抗體譜中ANA陽性，抗dsDNA抗體陰性，抗SsA抗體和/或抗ssB抗體陽性時，可在實驗室診斷幹燥綜合征。)
95.抗Jo-1抗體:多發性肌炎(PM)患者常呈陽性。
96.抗Scl-70抗體:進行性系統性硬皮病的診斷指標。
97.NCA:原發性血管炎的特異性血清標誌物。
98.類風濕性關節炎(RA):自身抗體包括RF、抗角蛋白抗體(AKA)和抗環瓜氨酸肽抗體(抗CCP)。
99.Farr法是公認的高特異性dsDNA抗體測定標準方法，當抗dsDNA抗體結合率大於20%時對SLE有意義。
100，抗線粒體抗體(AMA):原發性膽汁性肝硬化。
101.巨球蛋白血癥:壹種基於分泌IgM的漿細胞惡性增殖的疾病。常見於老年男性，主要表現為髓外浸潤，以肝、脾、淋巴結腫大為主要體征並伴有高粘滯綜合征，如視網膜出血。(血清呈膠狀，不易分離，電泳時有時難以遊動。聚焦病因是該病的電泳特征。)
102、異常免疫球蛋白檢測的應用原理
初步篩選實驗:區帶電泳分析、免疫球蛋白定量檢測、尿蛋白定性檢測。
確認實驗:免疫電泳、免疫固定電泳、血清和尿液中免疫球蛋白亞型、輕鏈蛋白的定量檢測。
103，HIV誘導的免疫反應
1.人體對HIV感染產生體液免疫反應後，可產生:中和抗體、抗P24外殼蛋白抗體、抗gp120和抗gp41抗體。
2.細胞免疫反應:CD8+T細胞反應和CD4+T細胞反應。
104，HIV抗原檢測:核心抗原p24(ELISA)
105，western blot法的標準為:①HIV抗體陽性:與p24帶同時出現至少兩條膜帶(gp 41/gp 120/gp 160)或至少壹條膜帶；②HIV抗體陰性:未出現HIV抗體的特異性條帶；③可疑HIV抗體:出現HIV特異性條帶，但帶型不足以確認陽性。
CD4+T細胞計數是反映HIV感染患者免疫系統損傷最明確的指標。當CD4+T細胞低於500/？l、很容易機會性感染；200以下/？l、艾滋病發生。
106，CEA大於60？G/L可見於結腸癌、胃癌和肺癌。術後6周，CEA水平正常。
107，AFP原發性肝癌。PSA前列腺癌
108，糖類抗原有:CA125:上皮性卵巢癌和子宮內膜癌；CA15-3:乳腺癌；CA19-9:胰腺癌，結直腸癌。
109，神經元特異性烯醇化酶(NSE)作為神經母細胞瘤和小細胞肺癌(P53，RB基因)的標誌物。
110.排斥反應包括宿主抗宿主反應(HVGR)和移植物抗宿主反應(GVHR)。
111.移植物存活與HLA配型的關系:①供受體HLA-A、HLA-B配型點數越多，移植物存活的概率越高；②供者和受者HLA-DR位點匹配更重要，因為HLA-DR和HLA-DQ基因之間存在很強的連鎖不平衡，DR位點匹配的個體通常也有匹配的DQ位點；③不同地區HLA配型程度與移植結果的關系有不同的預測價值。
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